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通常，一根色谱柱在分析数千个样品之后性能仍然保持良好，但也有的柱仅分析不多的样品后几乎就报废了。影响柱寿命和基它问题的因素很多，而有些因素是操作者很难控制的，如果被分析的样品（如分析生物样品），怎么净化样品也是“脏”的，对于色谱的柱影响是非常大的。然而采取下列措施后，在多数情况下总能够大为地减少柱上故障，达到延长柱寿命的目的。图1给出了进样达近13000次的色谱柱分离图。

1. 加流路过论器和保护柱
流路过滤器素靠进样阀后面，位于分析柱前。0.5μm烧结不钥钢片夹在死体积很小的套子中，挡住来源于样品和进样阀垫圈的微粒入柱。因为每个样品都过论既费事又带来误差，样品量少过论更困难，因此流路上装过涟器是比较省事的办法。也可以在流路加上保护柱，放在流路过论器和分析柱之问，或者代替流路过滤器：保护柱的使命是收集阻塞柱进口的来自样品的化学“垃圾”。这种垃圾终降低柱效能，保护柱是消耗品，分析50-100个比较脏的样品之后就要调换新的，保护柱应该是小体积，用分析柱的同种填料填装，保护柱使用得当，对分离无影响，好像未装保护住一样。有些厂商的商品将保护柱和流路过涟器连在一个单元内，使用起来非常方便。自己填装保护柱都是用短柱、不超过3cm长、内径2-3mm，用较大料度的填粒（15-20μm）干法填装，会使分析柱的效能有所降低。

2. 避免高压冲击
一般色谱柱都能经得起高压，但经不起突然变化的高压冲击。引起高压突然冲击，主耍是因样品阀的缓慢转动、泵起动快、往切换操作等：前面已讨论过，转动六通进样阀时从泵到柱的液流会瞬时一切断。在阀的泵侧压力升高，在阀的柱侧压力降低（变化超过20%）。阀转到底后压力突然冲击一下恢复正常。手动进样阀的变化不大，自动进样阀比较慢，可能造成压力冲击，可用氮气代替空气驱动进样阀。因氮压缩系数小。另外泵起动不应过快，可分步操作。如用3mL/min流速,先从13mL/min到23mL/min，然后再倒33mL/min，每个间隔应大于20s。柱切换技术的应用也很广泛，切换过程中在色谱柱的入口处压力在军到很大数字之间变化，会很快使柱报废。

3. 分离条件
多数色谱柱有很宽的试脸条件范圈，但其体应用又受到限制，主要是pH值、柱温和流动相的选择。硅胶为基质的键合相要求pH在2.5-7之间，极瑞pH的流动相能“溶解”硅胶，使键合相流失。结果非碱性组分的保留不断减少，碱性组分的保留增加，引起碱性组分峰变宽，如果一定要用高或低pH的流动相，可加预柱（饱和柱）。预柱装在泵和进样阀之间，用分析柱相同的填料填装，或者用普通硅胶。硅胶饱和了流动相，减少了分析柱填料的损失。预柱不要求柱效高，用价格低的一般硅胶疏松地填装，按期检查硅胶的溶解悄况。用预柱也有不利的影响，即新流动相难以平衡，保留时问不稳定或稳定慢，使用了预柱一定要加流路过论器，以防止硅胶徽粒引起的麻烦。以硅胶为基质的柱和阴离子交换柱超过动60℃后，会增加对流动相中化学物质的吸附。在高温下用小颗粒技引起柱床塌陷，降低柱效，改变峰形。在40℃以上使用3μm柱，70℃以上使用5μm柱，会使N值降低50%。有些流动相中的溶剂不能用于某些柱，如小颗料的聚笨乙烯填料不能用于非水的排阻色谱，另一方面，有些柱与某些溶剂（如四氢呋喃）一旦达到平衡，不要随意改用其它溶剂。有关这些特殊填料，可以参见有关资料。水溶性流动相会引起微生物生长而造成阻塞柱，色谱柱应存放在纯有机溶剂或加了 50%有机溶剂的水中。凝胶柱可存放在水溶性缓冲液中，同时加0.01%叠氮钠以防止微生物的生长。

4. 净化样品
用溶剂溶解的样品，多数组分在一定的时间内能*从柱中流出来，不会造成危害。有些样品可能含有橄粒物质，样品中的某种组分（如蛋白质）在柱头上沉积下来，组分在固定相上保留很强，溶剂带走柱填料，等等，这些都会造成柱效能下降或对往寿命的影响；有必要采取措施防止柱变坏。

如在光线照射下观察样品是浑浊的或带有乳白色，进样前必须要过滤。虽然流路上装有过涟器和保护柱，但不能代替样品的前处理，样品中过多的微粒会使过泌器和保护柱超载，很快阻塞，或者微粒进入分析柱，所以在进样前必须过滤样品。

若怀疑样品与流动相混合有沉淀而对色谱柱有阻塞，应先试验一下，看样品溶液加入流动相中有无变浑或乳白色出现。如果进样后压力突然增加而后又慢慢减小，表明样品中有微粒或发生沉淀。如有沉淀要设法改变分离条件，包括换样品溶剂和流动相，或处理样品去掉不溶物质。应尽 t 用小体积的样品。

有些样品能很强地吸附在柱填料上，这样会降低塔板数，改变样品的保留时间、峰形，并且使得基线变差。除了用预处理的方法除去强保留物质外，还要加保护柱，定期清洗色谱柱。有时因为疏忽，用对柱有吝的溶剂溶解样品，比如用6mol/L的氢氧化钠溶解样品,这样的样品只要进50-100μL到硅胶基质柱中，硅胶就很快溶解而使柱报废．在这种情况下，应立即中和样品，或除去原溶剂中的有害成分。

5. 用强溶剂定期冲洗柱
每次工作结束．用强溶剂冲洗柱是良好的习惯，可用甲醇、乙腈冲反相柱，冲去留在柱上的强吸附组分。用甲醇／水为流动相时也应冲洗。冲洗的程序在以下章节中介绍。

柱头的烧结不锈钢论片，要求平整， 死体积小，孔径适当（2-5μm）。过建片选择不好会改变色谱峰形．增加阻力或起不到阻挡污染物的作用（填料很快变色）。

此外，对柱硬件的保养也不可忽视。实际操作中应注意以下几点： ① 接头耍配套，用同一厂商的组接件； ② 接头之间、柱压帽螺母与密封卡套之间无微粒（填料），否则收紧时容易咬死；③ 密封卡套与柱管一次性卡紧后再也不能松动，所以拆开柱头再上紧时要小心，不能使卡套移动，原来柱端的不锈钢论片和垫片的厚度和强度也不能改变（改变这些附件的性能就促使卡套移动。）； ④ 接头等组接件不耍拧得过紧，适当上紧后接上泵试验，分步拧紧，直到不润为止，还有非常里要的是柱硬件的损坏往往会造成不可挽回的损失。

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