操作流程：
1待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。
2酶标板置4℃，包被过夜。
3洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍将洗涤液注满板孔后，即甩去，之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
4阴性对照孔每孔加入pbs 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人aif抗体工作液50μl。
5酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。
6洗板，同4。
7每孔加1:5000稀释的hrp-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
8酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。
9洗板，同4。
10每孔加tmb显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。
11每孔加100μl 2mol/l h2so4终止反应。
12分别测450nm 吸光值w1和630nm吸光值w2，终测得的od值为两者之差w1-w2，以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
13数据处理：在得出标本s和阴性对照n的 od值后，计算s/n值。s/n≥2.1为阳性判定标准。

试剂盒组成及试剂配制：
1. 酶联板（Assay plate ）：一块（96孔）。
2. 标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。
3. 样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4. 标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6. 标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7. 辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9. 浓洗涤液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10. 终止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
试剂和样本的控制方法：
一、试剂
1.试剂的选择：国家明确要求要采用批批检定的形式对ELISA试剂严格把关，我司严格按照国家标准进行，已获得国家承认的“三证”，每一个产品都有对应的批号，只要客户提前下单，我们就能为您提供新批次的产品，不必担心会有过期的试剂。我司的试剂，值得您选择。
2.试剂的准备：先将试剂盒先从冰箱中拿出来，在室温下放置20-30 min后，再进行测定，使试剂盒在使用前与室温平衡，这样做的目的能使反应微孔内的温度较快地达到所需的温度，以满足后面的测定需求。
二、样本
1.内源性干扰因素：包括类风湿因子、补体、高浓度的非特异免疫球蛋白、异嗜性抗体、某些自身抗体等；
类风湿因子的控制方法：
①用F(ab)2替代完整的IgG；
②标本用联有热变性IgG的固相吸附剂处理；
③检测抗原时，可用加入到标本稀释液中使RF降解。
ELISA 试验时，注意事项如下：
1. 正式试验时，应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件，待检样品应作一式二份，以保证实验结果的准确性。有时本底较高，说明有非特异性反应，可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。
2. 在ELISA中，进行各项实验条件的选择是很重要的，其中包括:
（1） 固相载体的选择：许多物质可作为固相载体，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体，在使用前均可进行筛选：用等量抗原包被，在同一实验条件下进行反应，观察其显色反应是否均一性，据此判明其吸附性能是否良好。
（2） 包被抗体（或抗原）的选择：将抗体（或抗原）吸附在固相载体表面时，要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0～9.6之间。吸附温度，时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18～24小时。蛋白质包被的zui适浓度需进行滴定：即用不同的蛋白质浓度（0.1、1.0和10μg／ml等）进行包被后，在其它试验条件相同时，观察阳性标本的OD值。选择OD值zui大而蛋白量zui少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1～10μg／ml。
（3） 酶标记抗体工作浓度的选择：首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定（见酶标记抗体部份）。然后再固定其它条件或采取“方阵法”（包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度）在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
（4） 酶的底物及供氢体的选择：对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应，而本身无色。有些供氢体（如OPD等）有潜在的致癌作用，应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体，如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后，应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间，以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制，尤其是H2O2在临用前加入 。
兔子可溶性内皮细胞蛋白C受体试剂盒   兔子可溶性内皮细胞蛋白C受体试剂盒   规格型号：   兔子可溶性内皮细胞蛋白C受体试剂盒，规格型号：，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：兔子可溶性内皮细胞蛋白C受体试剂盒、兔子可溶性内皮细胞蛋白C受体试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  8-Amino-2-naphthalenesulfonic acid  119-28-8  中文名：8-氨基-2-萘磺酸  分子式：C10H9NO3S  度：98.0%   

兔子可溶性内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)试剂盒     8-Azaguanine  中文名：8-氮杂  分子式：C4H4N6O  度：98.0%

兔子可溶性内皮细胞蛋白C受体(sEPCR) 试剂盒  试剂盒 组装/原装  1-(4-Fluorobenzyl)-2-chlorobenzimidazole  中文名：  分子式：C14H10ClFN2  度：98.0%

兔子可溶性细胞间粘附分子1试剂盒   兔子可溶性细胞间粘附分子1试剂盒   规格型号：   兔子可溶性细胞间粘附分子1试剂盒，规格型号：，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：兔子可溶性细胞间粘附分子1试剂盒、兔子可溶性细胞间粘附分子1 试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  7α-Hydroxysitosterol  中文名：7α-羟基谷甾醇  分子式：C29H50O2  度：95.0%

兔子可溶性细胞间粘附分子1试剂盒   兔子可溶性细胞间粘附分子1试剂盒   规格型号：   兔子可溶性细胞间粘附分子1试剂盒，规格型号：，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：兔子可溶性细胞间粘附分子1试剂盒、兔子可溶性细胞间粘附分子1 试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  7-Oxo-β-sitosterol  中文名：7-氧代-β-谷甾醇  分子式：C29H48O2  度：98.0%
油酸（标准品）   Oleic acid  质量规格：分析标准品,≥99.0%(GC) TNFsR-Ⅰ人肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ规格：48T/96T

反式-9-十八烯酸甲酯（标准品）  trans-9-Octadecenoic methyl ester  质量规格：分析标准品 小鼠球蛋白G2(IgG2)试剂盒 ，英文名： IgG2

对位红（标准品）   Para Red  质量规格：分析标准品,用于食品分析 大鼠甲状腺素(T4)检测试剂盒Ratthyroxine,T4

岩芹酸（标准品）  Petroselinic acid  质量规格：分析标准品,>99%(GC) 人酶(PON)试剂盒 Human paraoxonase,PON

D-泛醇（标准品）  D-Panthenol  质量规格：分析标准品 RatMethemoglobin,MHB大鼠高铁血红蛋白(MHB)试剂盒

糖精钠标准溶液（1.00mg/mL,基体：水）  Saccharin  salt solution  质量规格：1.00mg/mL,基体：水 DNA甲基转移酶-1(DNMT-1)活性酶连续循环比色法定量检测试剂盒20

桃醛（标准品）  γ-Undecanolactone  质量规格：0.96 Mousepituitaryadenylatecyclaseactivatingpolypeptide,PACAP试剂盒小鼠垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)试剂盒

甲基壬基甲酮（标准品）  2-Undecanone  质量规格：分析标准品 小鼠球蛋白G1(IgG1)试剂盒 ，英文名： IgG1

2′-脱氧胞苷 盐酸盐  2′-Deoxycytidine   质量规格：0.99 大鼠状腺原(T3)检测试剂盒Rati-iodothyronine,T3

氢二铵  Ammonium phosphatedi basic  质量规格：SP 人对称二甲基(SMDA)试剂盒 Human Symmeic dimethylarginine(SMDA)
鱼热休克蛋白40(HSP-40)elisa检测试剂盒免费代测
GMP-140 检测试剂盒小鼠脱羧酶自身抗体IgG(GAD-Ab-IgG)elisa分析检测试剂盒

小鼠脱羧酶自身抗体(GAD-Ab)elisa检测试剂盒

小鼠脱羧酶2(GAD2)elisa检测试剂盒

小鼠脱氢酶(GDH/GLDH)elisa检测试剂盒

小鼠脱氢酶(GDH/GLDH)elisa分析检测试剂盒
注：本公司提供试剂盒免费代测服务。需要其他Elisa试剂盒请咨询销售人员。产品仅用于科研