Sepax ProAqa Excel亲和色谱柱

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Sepax ProAqa Excel亲和色谱柱

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上海珂淮仪器有限公司

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我们的产品:
珂淮仪器(上海、淮安)有限公司产品涵盖仪器仪表、实验室仪器、医疗器械、工业品、生命科学仪器、分子生物学仪器、环境检测、无损检测、安全控制、光学仪器、量具量仪、分析仪器、水质分析、化学仪器、物理仪器、基础仪表、教学仪器等,总计数万种产品型号。产品广泛应用于机械制造、石油化工、环境监测、电子信息、生物制药、铸造冶炼、模具制造、汽车汽配、食品酿酒、纺织服装、工程建筑等各个行业。

我们的服务:

为企业提供完善的系统服务。

珂淮仪器 针对不同的行业设有专业客服人员,采取从产品选型、报价、签订合同、物流运输、跟踪售后的全程服务。在时间受理客户反馈的意见,并及时回复,帮助客户解决实际问题。


我们的理念:

诚信、专业、担当、双赢!


我们的客户:

销售网络覆盖全国,其中主要客户有:

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中科院巴斯德研究所

中科院上海植物生理生态研究所

东海水产研究所

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南京地理与湖泊研究所

大连化学物理研究所

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江苏省环境监测中心

平顶山市红十字中心血站

慈溪市


镇江市第二人民医院

北海市第二人民医院

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浙江省总队医院

山西长治医学院附属和平医院

昆明医学院附属医院头颈外科

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苏州大学

北京科技大学

山西大学

长江大学临床学院

第二军医大学

哈尔滨工业大学(威海)

哈尔滨医科大学


上海医药集团股份有限公司

山东绿叶制药有限公司

山东泰邦生物制品有限公司

沈阳康达制药集团有限公司

宿迁瑞康医药有限公司

浙江华方药业有限责任公司

上海赛金生物医药有限公司

江苏万邦生化医药股份有限公司

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马鞍山旭日曼迪新医药有限公司

启东东岳药业有限公司

天昊生物医药科技(苏州)有限公司

上海美迪西生物医药有限公司

湖北天胜药业有限公司

武汉康盛医药科技有限公司

浙江华方药业有限责任公司


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上海朗亮电子科技有限公司

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三得利啤酒(上海)有限公司

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杭州乐金化妆品有限公司

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详细信息

Sepax ProAqa Excel亲和色谱柱

概述

   ProAqa Excel亲和色谱柱适用于细胞系筛选或上游生物工艺优化和质量控制过程中快速准确的单克隆抗体定量。填料是由平均粒径20 µm、孔径1000-2000 Å的均一的PS/DVB填料颗粒与重组蛋白A配体偶联而成,该配体能与除IgG3以外的免疫球蛋白以及含Fc的融合蛋白结合。填料具有机械强度,可以承受高流速和高压操作。

技术参数

ProAqa Excel

参数

填料基质(粒径, 孔径)

均一的 PS/DVB(20 µm, 1000-2000 Å)

固定配体

重组蛋白A

色谱柱尺寸(内径×长度)

2.1 mm x 30 mm

色谱柱材质

不锈钢

Z大压力

200 bar

pH 范围

1.2-13.0

Z大流速

5 mL/min

流速

1-3 mL/min

CIP

0.1 M NaOH

结合缓冲液 pH

6.6-7.5

寿命

>2000次进样

标准进样量

10 µL

IgG 检测浓度

0.029-40 mg/mL*

LOD

0.29 µg

 
(*UV 280 nm: 0.029 -7.500 mg/mL, UV 300 nm: 0.117-40.000 mg/mL)
 
图1. ProAqa Excel 填料扫描电镜图

均一的Sepax填料颗粒(20 µm)  D90/D10<1.3  

订货信息

 
 
规格 内径×长度 (mm×mm)

材质

柱体积(mL

订货号

标准规格

2.1×30

不锈钢

0.1

271120980-2103S

定制规格

2.1×50

不锈钢

0.17

271120980-2105S

4.6×35

不锈钢

0.58

271120980-4603S

4.6×50

不锈钢

0.83

271120980-4605S

4.6×100

不锈钢

1.66

271120980-4610S

填料特性

 快速的抗体滴度测定
流速快达 3 mL/min
总循环(含平衡)时间可小于0.5 min
 线性响应范围高达40 mg/mL
UV 280 nm: 0.029 - 7.50 mg/mL, LOD 0.294 µg
UV 300 nm: 0.117 - 40.0 mg/mL
 耐用性: > 2000次进样
 重现性: 优良的批间一致性
 适用于不同含量的CHO细胞中蛋白的含量测定
 兼容HPLC、UPLC 和FPLC 系统

空白对照

要使用高纯度的缓冲液,缓冲液使用前需要排气和过滤(0.22 μm)。进样前,请务必做空白对照,并仔细检查峰积分结果中是否存在噪音或基线绘制不正确。为了降低结合缓冲液和洗脱缓冲液转变时引起的基线波动,建议使用:
(a)50 mM磷酸盐(pH 7.0),0.15 M NaCl作为起始/冲洗溶液。
(b)100 mM磷酸钠,0.15 M NaCl(pH 2.5)或100 mM甘氨酸,0.15 M NaCl(pH 2.5)作为洗脱缓冲液。
这些是对信号噪音有效的洗涤/洗脱液。盐酸(HCl)能使抗体变性,所以洗脱产品如果需要生物活性的话,不建议添加HCl。

起始/冲洗溶液

(a)大多数情况下,可以使用简单的缓冲液,例如10-100 mM的磷酸盐或Tris。
(b)结合/洗脱缓冲液的pH范围为6.0-7.5,但是请注意,在较高的pH范围下结合力强。
(c)添加一些盐(0.1-0.2 M NaCl或KCl)抑制蛋白间相互作用的非特异性吸附。

洗脱条件

对于分析应用,使用25-100 mM磷酸盐(pH 2.0-3.5),含或不含高达150 mM的NaCl。可以使用的其他洗脱缓冲液成分包括磷酸钠、盐酸、甘氨酸、柠檬酸盐、醋酸盐以及其他含低pH成分的缓冲液。
由于抗体的结合/洗脱行为因种类和亚类而异,因此应凭经验确定洗脱条件。

样品准备和上样

为了保证高效结合和避免柱子滤片堵塞,样品一般按以下方式准备:
(a)溶解或交换样品到起始/洗涤缓冲液,这对于大份样品(大于25%柱体积)尤其重要。
(b)进样前离心或用0.22 μm滤膜过滤样品。
(c)热处理血清样品(56℃加热30 min)去除残留的纤维蛋白原,它们会在多次运行中阻塞色谱柱。
(d)尽可能对样品脱脂,因为脂质会引起不可逆的结垢。

为保证高效结合及避免填料和色谱柱污染,需要确认上样量:
(a) 图2和图3显示了ProAqa Excel色谱柱的动态测试范围。
(b) 其他抗体的结合能力取决于抗体来源和亚类。
(c) 需要优化结合和洗脱条件并用样品确认,以确保达到结合平衡和*洗脱。
(d) 在分析应用中,Z小和Z大载量应该通过标准曲线的线性确定(如图2所示,对于样品浓度在0.029-7.500 mg/mL的常用定量分析,可以将检测波长设置为280 nm。如图3所示,如果样品浓度较高(高达40 mg/mL),波长可设置为300 nm。在该分析应用中,建议使用双波长检测(280 nm和300 nm)。

Sepax ProAqa Excel亲和色谱柱

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