C肽放免试剂盒，科研专用

C肽（C-Peptide）又称连接肽，由胰岛β细胞分泌，它与胰岛素有一个共同的前体胰岛素原。

[用途]及检测意义 1) 指导胰岛素治疗，C 肽测定可以确定是否继续使用胰岛素治 疗，还是用口服降糖药或饮食治疗。C 肽的测定值对糖尿病具有重要意义。 2) 对低血糖综合症的诊断。 3) 对胰岛移植和胰腺移植的样本，C 肽测定可以了解移植是否存活和 B 细胞的功能。 4) 同时测定 C 肽和胰岛素可了解肝病的变化，如肝硬化时，外周血 C 肽/胰岛素的比值下 降。

[试验原理] ，通过二抗沉淀抗原-抗体免疫复合物来测定血清中 C 肽的含量，待测血清、标准品中的 C 肽和 125I-C–P 与有*的抗体竞争结合。125I-C–P 一 部分与抗体结合为复合物，另一部分游离。加入分离试剂，离心使复合物部分沉淀，与游离 部分分离，弃去上清液，测定沉淀物的放射性计数。待测血清和标准中的 C 肽含量与与复合 物的放射性强度呈负相关，用一系列不同浓度的 C 肽作标准，可获得标准曲线，从标准曲线 上可查出血清中 C 肽的含量。

[注意事项] 1) 收到分析试剂盒后，尽快存放在 2 – 8℃。 2) 由于 C 肽在溶液状态下极不稳定，所以先溶解标记物、抗体，待一切准备工作完毕后， 后溶解标准品。如果分析试剂盒一次用不完，要做若干次，那么把标准品溶解后尽快 分装成若干份，并立即存放在–20℃保存，避免反复冻融。C 肽标记物的分装、使用、 保存同标准品程序，避免反复冻融。 3) 在加分离试剂前，将分离试剂摇匀。 4) 分析试管放在 4℃温育时，好套上塑料袋，避免蒸发，保持一定的反应体积。

[实验方法] 1、 将实验所需试剂及样本放置室温，冻干品按操作要求进行溶解,平衡至少 30 分钟 以上才可进行操作； 2、 取 60X12mm 聚苯乙烯管进行编号，所有实验均做双管重复； 3、 每个 NSB 管加入 200µl 温育液，每个标准品“0”管 加入 100µl 温育液； 4、 取每个浓度的标准品（A~F）、质控血清和样本 100µl 加入相应编号的试管中； 5、 每管均各加入 100µl 标记物工作液； 6、 除 T、NSB 管外，每管均各加入 100µl 抗体工作液，充分混匀； 7、 4℃温育 24 小时； 8、 每管均各加入 500µl 分离剂后，充分混匀； 9、 室温放置 15 分钟后，离心 3500 转／分，20 分钟后，吸去或倾倒掉上清液； 10、 用 γ-计数器测定每管 1 分钟的放射性强度计数； 11、 从标准曲线上读取样本及质控血清的浓度。

[实验过程中应注意] 1、 γ-计数器本底计数应≤100CPM/分，效率应≥75％； 2、 加入放射性标记物时，应做好防护、小心谨慎，以避免造成放射性污染； 3、 如果某一个样本的测定值高于ZUI高浓度的标准品浓度，用零标准品以 1：2 或 1： 4 的比例稀释样本后重新测试，测试结果乘以相应的稀释倍数。

[质量控制] 每次实验操作应至少采用两个浓度的质控血清进行质量控制，以确保每次实验测定结果 的可靠性。 1、 质控血清的平均值应在允许范围内； 2、 曲线方程应采用佳拟合方式； 3、 重复样本的测定结果相差在 15％以内。 如不能同时满足以上条件，则此次试验结果无效，全部试验需重新进行。

C肽放免试剂盒，科研专用

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