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浅谈实验室细菌菌种的保存2

时间:2011-09-09      阅读:2068

1 甘油液保存法

将已分纯的待存菌接种于肉汤中,37℃培养18~24h,然后按5份肉汤溶液、2份甘油-生理盐水保存液的比例分装于灭菌的微量离心管或细胞冻存管中,贴上标签,置-80℃~-20℃冰箱保存。此法操作简便,不需要特殊设备,效果好,可以保存菌种3年左右,无变异现象,而且此方法还可以保存一些要求较高的特殊菌种,适用范围广。所以此方法适合实验室普通菌种或特殊菌种的较长期的保存[4]。
2 湿牛奶冻存法
将待存菌种于各自生长良好的平板培养基上,经分纯后放入培养箱培养。用准备好的保护剂牛奶洗下菌苔,再用无菌毛细滴管吸取菌悬液滴入菌种管球部,每管球部约有一半的菌液,之后火焰封口,贴上标签,保存于-20℃冰箱。此方法操作比较简便,不需特殊设备、不需要花费很多时间,而且保存时间大约3年,时间较长,不易变性,也不容易污染。所以此方法适合实验室菌种较长时间的保存[3]。
3 蒸馏水保存法
取灭菌蒸馏水6~7ml加于已接待存菌斜面培养基的试管内,用吸管研磨,洗下斜面上的菌苔,充分混匀,将此菌液分装于灭菌的螺旋小瓶中,或用胶塞密封,贴上标签,置于4℃保存。此法制作简单,不需要特殊设备,且不需要经常移种,而且可以保存数年,但要注意保存的时候需要直立放置。所以此方法适合实验室菌种的长期保存[4]。
4冷冻真空干燥法
将待存菌分纯后,用准备好的保护剂牛奶洗下菌苔,把菌悬液滴入菌种管后,在管口抽取少许棉花塞入管内*处,放入冰箱-40℃速冻40min,放入准备好的混有盐的冰中,接上真空泵,真空抽干呈粉末状,火焰封口,贴上标签,保存于-40℃冰箱。此法保存时间长,可达15年,不易变性,但需要仪器,一般实验室难以配备,而且过程复杂,操作难度大,需要较长时间才能完成。所以此方法适合具有条件的实验室菌种的长期保存[3]。
6小结
综上所述,我们在做实验过程中或者短期保存菌种时,可以选择斜面低温保存法、半固体琼脂法、液体石蜡保存法、高层半固体琼脂石蜡保存法、纸片法,进行保存;如果需要较长时间的保存菌株,可以选择甘油液保存法、湿牛奶冻存法、蒸馏水保存法、冷冻真空干燥法保存菌株,其中冷冻真空干燥法需要实验室配备好相应的仪器设备。如果一些菌株营养要求比较高的话,可以选择甘油液保存法、冷冻真空干燥法保存。当然上述菌株保存的方法不是、zui方便的保存法,还需要我们不断的探索,不断的研究,找到一种或几种简单、方便、时间长的保存方法。

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