柱式真菌DNAout

本产品是真菌DNAOUT的柱式升级产品，能够破裂各种真菌坚硬的外壳。同时使用硅胶膜DNA纯化技术，得到的DNA适用于各种后续实验。
1. DNA纯净，OD260/280一般都在1.9左右。可直接用于PCR、酶切、杂交等。DNA产量在2-10 μg/mL饱和菌液，DNA片段大小在30-50 Kb左右。
2. 操作简单，整个过程约15分钟。
3. 能处理真菌菌丝、孢子和子实体等各种形式的真菌样品。
4. 安全无毒，本试剂盒对人体无毒，无腐蚀性和刺激性气味。
5. 适合于各种真菌，包括酵母(S. cerevisiae、S. pomb、Pichia pastoris、Cryptococcus neoformans、Myxozyma mucillagina)、动物病原真菌(如：Candida albicans、Aspergillus niger)和植物病原真菌(如：Collectotrichum musae、Fusarium oxysporum)。
RNA提取法：试剂中的主要成分为异硫氰酸胍和苯酚，其中异硫氰酸胍可裂解细胞，促使核蛋白体的解离，使RNA与蛋白质分离，并将RNA释放到溶液中。当加入氯时，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA进入水相，离心后可形成水相层和有机层，这样RNA与仍留在有机相中的蛋白质和DNA分离开。水相层(无色)主要为RNA，有机层(黄色)主要为DNA和蛋白质。
实验步骤：
1、RNA的提取;
2、反转录合成cDNA;
3、PCR扩增;
4、产物的电泳和结果的测定。
RT-PCR是将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA，再以cDNA为模板，扩增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或两步法的形式进行。在两步法RT-PCR中，每一步都在zui条件下进行。
碱变性提取质粒DNA是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而达到分离目的。在pH高达12.6的碱性条件下，染色体DNA的氢键断裂，双螺旋结构解开而变性。质粒DNA的大部分氢键也断裂，但超螺旋共价闭合环状的两条互补链不会*分离，当以pH4.8的NaAc高盐缓冲液去调节其pH至中性时，变性的质粒DNA又恢复原来的构型，保存在溶液中，而染色体DNA不能复性而形成缠连的网状结构，通过离心，染色体DNA与不稳定的大分子RNA、蛋白质-SDS复合物等一起沉淀下来而被除去。
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