3T6-Swiss albino细胞,小鼠胚胎成纤维细胞价格

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详细信息

新学期开学*,现货供应:3T6-Swiss albino细胞,小鼠胚胎成纤维细胞价格,详细信息:

【细胞生长】:贴壁生长或悬浮生长
【细胞形态】:上皮样、多形态细胞样等形态
【规格】:5×1000000cells/瓶
【包装】:内层无菌自封袋、防压泡沫盒、外层防压保温气泡袋、说明书。
【价格】:电询/询价。(或)
【发票】:增票/普票
【细胞传代】:1:3 传代
【细胞活力】:90%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
【细胞检测】:细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌
【细胞冻存】:液氮冻存(基础培养基+10%DMSO+20%FBS)

新学期开学*,现货供应:“3T6-Swiss albino细胞,小鼠胚胎成纤维细胞价格 ”优质产品后,在倒置显微镜下观察整个细胞生长情况:
如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,留10ml培养液继续培养。
如果细胞已长满(达80-90%),即可进行传代,具体步骤如下:
1)弃去培养液,用PBS洗1-2次。
2)向瓶内加入1.0-2.0ml*液,再倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆,迅速拿回操作台,吸取*,加含有6ml含10%的血清的培养液,轻轻吹打细胞。
3)加入等量的培养液,轻轻吹打混匀后吸出一半,分到新别的地方培养。

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新学期开学*,现货供应;技术相关问答:
1、培养细胞时应使用5 % 或10% CO2?或根本没有影响?
一般培养基中大都使用HCO3-/CO32-/H+ 作为pH 的缓冲系统, 而培养基中NaHCO3 的含量将决定细胞培养时应使用的CO2 浓度。当培养基中NaHCO3 含量为每公升3.7 g 时,细胞培养时应使用10 % CO2;当培养基中NaHCO3 为每公升1.5 g 时, 则应使用5 % CO2 培养细胞。
2、何时须更换培养基?
视细胞生长密度而定, 或遵照细胞株基本数据上之更换时间,按时更换培养基即可。
3、培养基中是否须添加抗生素?
除于特殊筛选系统中外, 一般正常培养状态下, 培养基中不应添加任何抗生素。
4、附着性细胞继代时所使用之trypsin-EDTA 浓度?应如何处理?
一般使用之trypsin-EDTA 浓度为0.05% trypsin-0.53mMEDTA.4 Na。*次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中, 保存于–20 ℃,避免反复冷冻解冻造成trypsin 之活性降低, 并可减少污染之机会。
5、悬浮性细胞应如何继代处理?
一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中, 稀释细胞浓度即可, 若培养液太多时, 可将培养角瓶口端稍微抬高, 直到无法容纳为止。分瓶时取出一部份含细胞之培养液至另一新的培养角瓶, 加入新鲜培养基稀释至适当浓度, 重复前述步骤即可。
6、欲将一般动物细胞离心下来,其离心速率应为多少转速?
欲回收动物细胞, 其离心速率一般为300xg (约1,000rpm),5 - 10 分钟, 过高之转速, 将造成细胞死亡。
7、细胞之接种密度为何?SHZ-88大鼠乳腺癌细胞
依照细胞株基本数据上之接种密度或稀释分盘之比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生长之一重要原因。
8、细胞冷冻培养基之成份为何?
动物细胞冷冻保存时zui常使用的冷冻培养基是含5 - 10 %DMSO (dimethyl sulfoxide) 和90 - 95 % 原来细胞生长用之新鲜培养基均匀混合之。注意:由于DMSO 稀释时会放出大量热能, 故不可将DMSO 直接加入细胞液中, 必须使用前先行配制完成。
9、DMSO 之等级和无菌过滤之方式为何?SHZ-88大鼠乳腺癌细胞
a D2650), 其本身即为无菌状况, *次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中, 保存于4°C, 避免反复冷冻解冻造成DMSO 之裂解而释出有害物质, 并可减少污染之机会。若要过滤DMSO, 则须使用耐DMSO 之Nylon 材质滤膜。
10、冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase *储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase*储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
11、细胞欲冷冻保存时, 细胞冷冻管内应有多少细胞浓度?
冷冻管内细胞数目一般为1x106 cells/ml vial, 融合瘤细胞则以5x106 cells/ml vial 为宜。
12、应如何避免细胞污染?
细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之方法。
13、如果细胞发生微生物污染时,应如何处理?SHZ-88大鼠乳腺癌细胞
加入相应抗生素。直接灭菌后丢弃之。
14、支原体(mycoplasma) 污染的细胞, 是否能以肉眼观察出异状?
不能。除极有经验之专家外,大多数遭受支原体污染的细胞株,无法以其外观分辨之。
15、支原体污染会对细胞培养有何影响?
支原体污染几乎可影响所有细胞之生长参数, 代谢及研究之任一数据。故进行实验前,必须确认细胞为mycoplasma-free,实验结果之数据方有意义。
26、CO2 培养箱之水盘如何保持清洁?
定期(至少每两周一次) 以无菌蒸馏水或无菌去离子水更换之。
27、为何培养基保存于4 ℃ 冰箱中, 颜色会偏暗红色, 且pH值会越来越偏碱性?
培养基保存于4 ℃ 冰箱中, 培养基内之CO2 会逐渐溢出,造成培养基越来越偏碱性。而培养基中之酸碱指示剂(通常为phenol red) 的颜色也会随碱性增加而更偏暗红。培养基偏碱之结果, 将造成细胞生长停滞或死亡。若培养基偏碱时, 可以通入无菌过滤之CO2, 以调整pH 值。

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