货号：WT-E5171【牛支原体(mycoplasma)ELISA试剂盒原理】ELISA试剂盒规格：48T/96T

上海蔚霆生物公司专业销售美国 DRG R&D 、标准品，对照品，生物试剂，科研抗体，细胞株等，生物耗材等，还代理了sigma,R&D,ScienCell,ATCC,wak0,omega，Worthington、MBI、Bioworld、Calendon等国外各类公司的产品。ELISA试剂盒规格为96T和48T，中英文双版说明书，适用于人及各种动物种属小鼠、大鼠、豚鼠、兔、犬、鸡、马、猴、羊、猪、牛等等种属标本课题待检样本：体液，血清，血浆，细胞培养上清液，尿液，组织匀浆,心房水标本等等。并且还提供免费代检测服务。（为您节省时间）。如需订购，请点击左上角的()进行咨询

【牛支原体(mycoplasma)ELISA试剂盒原理】操作步骤

1标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在*、第二孔中分别加标准品100μl，然后在*、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从*孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为（600 ng/L，400ng/L ，200ng/L，100 ng/L，50 ng/L）。

2：加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品zui终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3：温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。  

4：配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用

5：洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6：加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

【牛支原体(mycoplasma)ELISA试剂盒原理】7：温育：操作同3。

8：洗涤：操作同5。

9：显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.

10：终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11：测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

计算

  以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

【牛支原体(mycoplasma)ELISA试剂盒原理】注意事项

1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，*使用排枪加样。

4． 请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔*孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请zui后乘以总稀释倍数（×n×5）。

5． 严格按说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准

6．底物请避光保存。

7．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9．本试剂不同批号组分不得混用。

10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。

检测范围：（请：）

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