甜菜坏死黄脉病毒(BNYVV)ELISA试剂盒方法
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甜菜坏死黄脉病毒(BNYVV)ELISA试剂盒方法

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货号:WT-E5702【甜菜坏死黄脉病毒(BNYVV)ELISA试剂盒方法】规格: 48T/96T

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【甜菜坏死黄脉病毒(BNYVV)ELISA试剂盒方法】ELISA结果判定常用的几种方法

    1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。

    2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD+23SD,作为阳性结果的阈值。

    3)PN(阳性孔OD值/阴性孔OD)大于或等于21为阳性;PN值小于21,但大于15为可疑;PN小于15为阴性。

4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。

【甜菜坏死黄脉病毒(BNYVV)ELISA试剂盒方法】样本处理及要求:

1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。

2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。

3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

【甜菜坏死黄脉病毒(BNYVV)ELISA试剂盒方法】4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBSPH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBSPH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8的温度。加入一定量的PBSPH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20保存,但应避免反复冻融.

7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。【甜菜坏死黄脉病毒(BNYVV)ELISA试剂盒方法】

 

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