大鼠肠微血管内皮细胞
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大鼠肠微血管内皮细胞

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货号: BJ-X97187
上海邦景实业有限公司

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详细信息

商品属性:
产品名称:
大鼠肠微血管内皮细胞
货号:BJ-X97187
规格:5×10Cells/T25培养瓶
分类:原代细胞
商品介绍:

名称 大鼠肠微血管内皮细胞
 
2.组织来源:肠组织

3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶

4.细胞简介:

大鼠肠微血管内皮细胞分离自肠道组织;肠道指的是从胃幽门至的消化管。肠是消化管中长的一段,也是功能重要的一段。哺乳动物的肠包括小肠、大肠和直肠3大段。大量的消化作用和几乎全部消化产物的吸收都是在小肠内进行的,大肠主要浓缩食物残渣,形成粪便,再通过直肠经排出体外。肠道堪称身体劳累的器官——每天不停地消化、吸收食物,以提供足够的养分,其实它的功能还远不止此——它还是机体内大的微生态系统。微血管是极细微的血管,管径平均为6-9μm,连于动、静脉之间,互相连接成网状。微血管壁薄,管径较小,血流很慢,通透性大。其功能是利于血液与组织之间进行物质交换。其管壁主要由一层内皮细胞构成,在内皮外面有一薄层结缔组织。另外还常可见到一种扁而有突起的细胞贴在微血管的管壁外面,称为周细胞。

5.方法简介:

公司实验室分离的大鼠肠微血管内皮细胞采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。

6.质量检测:

公司实验室分离的大鼠肠微血管内皮细胞CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

7.培养信息:

包被条件 PLL0.1mg/ml),明胶(0.1%

培养基 FBS、生长添加剂、PenicillinStreptomycin

换液频率 2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 内皮细胞样

传代特性 可传2-3

消化液 0.25%

培养条件 气相:空气,95%CO25%

细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1
)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640GIBCO,货号21875-091)90%;优质胎牛血清,10%
2
)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%
3
)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
产品仅用于科研
1
)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2
)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1215的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

灰葡萄孢   木糖氧化产碱菌木糖氧化亚种

球型芽孢杆菌   宽圆羊肚菌

普通变形杆菌冻干粉   多头被孢

假结核耶尔森氏菌   苏云金芽胞杆菌鲇泽变种Bacillusthuringienisvar.aisawai

土白蚁丛毛单胞菌   肺炎链球菌ATCC49619冻干粉
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操作要点:
1
)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2
)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过最易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3
)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4
800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5
)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6
)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。


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