气相色谱仪测定竹叶多糖超临界CO2提取物

武汉泰特仪器产品涵盖气相色谱仪、气相色谱配套、样品处理设备、柱后衍生系统等，是国内*的分析仪器系统供应商。本文由武汉泰特沃斯科技有限公司色谱技术人员主要介绍气相色谱柱前衍生化测定竹叶多糖超临界CO2提取物。

竹子是禾本科(Poaceae)竹亚科(Bambusoideae)多年生常绿植物，中国是世界上竹类资源较丰富的国家之一，现有竹林面积约500万hm2，占世界*位。竹叶多糖(bamboo polysaccharides，BPS)是一种中等相对分子质量的杂多糖，作为药用开始于1943年，诸多研究者对竹叶多糖进行了深入研究，证实竹叶多糖具有明显的药用效果，竹叶活性多糖有抗癌活性，抗氧化作用和免疫调节等作用。

以往研究者对竹叶多糖的提取多采用水提法，微波法，超声波法等。超临界流体萃取(supercritical fluid extraction，SFE)是利用流体在临界点附近所具有的特殊性质而形成的一系列应用技术。超临界二氧化碳流体具有液体的高密度、气体的低黏度，可以和样品充分的接触，大限度的发挥其溶解能力，采用在超临界CO2系统中加入适宜的夹带剂或改性剂(如甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、水等)可以改善对极性较强、分子量较大的物质的提取效率，使得难以提取的多糖等强极性物质的超临界CO2提取成为可能。虽然利用超临界CO2流体萃取技术萃取某些植物多糖的研究已有报道，但采用超临界CO2流体萃取技术萃取竹叶多糖的研究还未见报道。

以高效制备竹叶多糖为研究目标，采用添加夹带剂的超临界CO2萃取方式提取竹叶多糖，基于种植面积较大、数量较多的竹种，选择禾本科竹亚科刚竹属的毛竹、禾本科大明竹属的苦竹、禾本科绿竹属的绿竹以及竹亚科酸竹属的黄甜竹4个种的竹叶为实验材料，利用超临界二氧化碳提取工艺提取竹叶多糖，对得到的竹叶多糖提取物先经三氟乙酸水解，再与乙酸酐进行柱前衍生化反应，通过毛细管柱气相色谱仪，外标法定量研究4种竹叶多糖水解得单糖的物性特征，所得数据资料旨在为合理利用生物量丰富的竹叶资源及制备高含量竹叶多糖提供参考依据。

气相色谱仪测定竹叶多糖超临界CO2提取物

超临界CO2流体萃取竹叶多糖

以葡萄糖为标定多糖含量的标准物质，葡萄糖质量浓度与吸光度的关系曲线回归方程：y＝30.065x＋0.0872 [x为吸光度；y为葡萄糖标准溶液的质量浓度/(μg/mL)]，相关系数R2＝0.9992。实验表明标准葡萄糖在8～24μg之间呈良好的线性关系。

4个种的竹叶多糖提取率

采用超临界CO2提取竹叶中的多糖，冷冻干燥后的4个种的竹叶多糖的实物得率分别为毛竹4.283%、苦竹4.755%、绿竹6.816%、黄甜竹5.498%，4个种的竹叶多糖超临界CO2提取物多糖含量：毛竹13.311%、苦竹24.333%、绿竹29.894%、黄甜竹15.014%。数据证明，超临界CO2流体提取多糖的提取率远远高于水提法，超声波法及微波法，传统的提取方法提取效率较低、且费时。

本研究所用的超临界CO2流体制备竹叶多糖的方法，出于从食品安全角度考虑，采用的夹带剂是乙醇-水体系，实现了整个工艺过程的无污染操作。在超临界CO2流体萃取竹叶多糖的过程中采用静态萃取与动态萃取兼顾的萃取方法，不仅萃取效率高，而且节省CO2气源与能源。

4个种的竹叶多糖含有量

通过葡萄糖标准曲线及竹叶多糖计算公式计算得到干竹叶中竹叶多糖的含量。4个种的竹叶中绿竹的多糖含量为16.585mg /g，其次是黄甜竹为12.804mg/g，毛竹为8.255mg /g，苦竹为6.329mg/g。绿竹、黄甜竹与毛竹多糖含量差异显著(P＜0.05)，绿竹、黄甜竹与苦竹多糖含量差异显著(P＜0.05)，苦竹与毛竹多糖含量差异不显著性(P＞0.05)。

采用静态萃取与动态萃取兼顾的超临界CO2流体提取竹叶中的多糖，竹叶多糖的实物得率4.283%～6.816%，提取物多糖含量13.31%～29.89%。超临界CO2流体提取竹叶多糖，具有提取效率高、无污染、成本低的优点。

4个种的竹叶单糖组成主要为葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖、岩藻糖、鼠李糖、及少量木糖和甘露糖，单糖含量为2.315～6.395mg/g。苦竹、绿竹、毛竹中葡萄糖的含有量较大，黄甜竹竹叶中半乳糖含量较大，绿竹叶中的葡萄糖含有量较高。