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SK-N-FI人脑神经母细胞瘤细胞
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生产厂家上海雅吉生物科技有限公司成立于2011年3月,是一家面向生命科学领域,提供科研类试剂、耗材、仪器、技术服务的生物企业。包括分子生物学、免疫学、微生物学、细胞学等 。旗下拥有 “雅吉生物”、“晶风生物”、“彩佑实业”、“GTX” 品牌。通过公司各部门员工的共同努力在行业内享有一定的声誉,深得新老客户厚爱。本着“服务、诚信、进取”的精神,坚持沟通你我,创新服务,为国内外广大用户提供产品和服务。
雅吉生物的试剂盒,在国内众多重点实验室广泛使用,深受广大科研人员好评,先后在各杂志文章中被引用,欢迎选购。公司在重视产品质量的同时,也建立了一套多部门联动服务体系,努力把我们方便、快捷、周到的服务提供给每一个客户。
本公司郑重承诺:质量保证、供货及时、服务周到。
SK-N-FI人脑神经母细胞瘤细胞后,请按照以下方法进行操作:
取出25cm2培养瓶,75%酒精擦拭培养瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中静置3-4小时以稳定细胞状态,然后换用新鲜*培养液继续培养或进行传代。
2、细胞传代:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入*培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀细胞用12ml*培养基重悬,然后按1:2比例进行分瓶传代,后放入37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)待细胞*贴壁后,观察培养结果,之后进行换液培养或传代。
3、细胞冻存:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入*培养液终止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;
3)用适量的冻存液(FBS:DMSO=9 :1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜,24h后转入液氮中进行长期保存。使用程序降温盒可直接放入-80℃。
4、细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2)将冻存管中的细胞移至含5ml*培养基的15ml离心管中, 1000rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀用5ml*培养基重悬,接种25cm2培养瓶,于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)第二天,换用新鲜*培养基继续培养。
SK-N-FI人脑神经母细胞瘤细胞常见问题及解决方法:
1、观察细胞密度用(4X物镜)低倍镜观察,以便正确的判断细胞密度;观察细胞形态请用(10X 或 20X)高倍镜观察;
2、瓶中运输的培养液不能重复使用,请换新鲜培养液培养;
3、有些细胞贴壁不牢,如发现贴壁细胞有脱落,可离心重悬后接种到新瓶内;
4、收到细胞后,若发现培养瓶破损、漏液及细胞污染,请及时与我们。
5、培养瓶有破裂,培养液有漏液:细胞极大可能会污染,所以我们会及时安排帮老师解决。
6、细胞漂浮:培养瓶不开封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。1-2 小时后观察,
7、如细胞大部分又贴回瓶底,表明细胞活力正常,剩余漂浮的细胞可以去掉,留 8-10ml 培养液培养观察,细胞生长至汇合度 85-95%,进行消化传代;如细胞还是不贴壁, 将细胞离心收集转到新培养瓶,原培养瓶加部分培养液继续培养,中间注意观察,我 们的技术人员会一直跟踪指导,直到问题解决。
8、细胞消化铺板,细胞死亡较多。 *消化时间掌控好切勿消化过度,第二终止要*(以T25瓶为例,加1ml胰酶用5ml*培养基终止),第三控制吹打次数和力度,避免损伤。
我公司代理销售ATCC来源,sciencell来源,上海细胞库来源等细胞销售,另我公司有自建细胞库,生产培养各类细胞系,采用灌注法制备各种原代细胞。