淀粉分支酶(SBE)检测试剂盒

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淀粉分支酶(SBE)检测试剂盒

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公司以“用户,用心服务”为核心价值,始终把满足客户需求、提供全面服务作为服务宗旨,在不断的发展和完善过程中提升技术服务水平。我们相信,通过我们的不断努力和追求,一定能够实现与客户的互利共赢!

 

详细信息

淀粉分支酶(SBE)检测试剂盒

需自备的的仪器和用品

可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰、蒸馏水

试剂的组成和配制

提取液液体60mL×1瓶,4保存;

试剂一:液体20mL×1瓶,4保存;

试剂二:粉剂×2支,4保存;临用前每支加入1mL双蒸水,充分溶解后备用;

试剂三:液体25mL×1瓶,4保存;

试剂四:液体5mL×1瓶,4保存;

粗酶液提取

称取约0.1g组织加入1mL提取液,冰浴中匀浆。15000g 4离心15min,取上清,置冰上待测。

测定步骤

试剂名称(μL

对照管

测定管

煮沸1min后灭活的粗酶液

250

 

粗酶液

 

250

试剂一

320

320

试剂二

30

30

混匀,37准确保温20 min,置沸水浴中1 min终止反应(盖紧防止水分散失),冷却

试剂三

500

500

试剂四

40

40

混匀,室温静置10min,用蒸馏水调零,660nm读取各管吸光值。

注意:

1可以在不同对照管中加入不同样品的粗酶液,然后集中进行1min沸水浴处理。

2试剂一如有沉淀,加入之前要使之充分溶解混匀。

SBE活力单位的计算

方法(一)按照蛋白浓度计算

单位的定义:以波长660nm的吸光度下降百分率表示,每mg蛋白在反应体系中每降低1%dian蓝值为一个酶活性单位。

  1. 活性(U/mg prot=A对照管-A测定管)/A对照管÷蛋白浓度(mg/mL) ×100

方法(二)按照样本鲜重计算

单位的定义:以波长660nm的吸光度下降百分率表示,每g组织在反应体系中每降低1%dian蓝值为一个酶活性单位。

SBE活性(U/g 鲜重=A对照管-A测定管)/A对照管÷样本鲜重(g/mL) ×100

 

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