WB蛋白免疫印迹

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伊莱博生物科技(上海)有限公司(简称,伊莱博生物),总部位于上海市长江软件园,2024年1月与上海大学医学院成立联合研究中心,是一家以生命科学研究为基础,专注于研究成果转化及技术服务的创新型高科技企业。主要致力于为科研人员及机构提供专业的技术团队和实验平台,建立包含肿瘤生物学、病理学、免疫学、细胞生物学、生物化学与分子生物学和动物实验等学科的研究服务体系。

伊莱博生物拥有丰富的研究经验,具备完善的系统化管理能力和科研服务体系。目前已自建细胞、分子、病理等实验平台近1000平方米,拥有的仪器设备、细胞库、样本保存库等。动物实验中心近1800平方米,可满足同时饲养清洁级和SPF级动物。核心实验技术团队主要来自中国科学院大学、复旦大学、上海交通大学等重点高校及科研机构,能够为客户提供研究方案策划、项目实施及项目深度分析等方面的技术支持。公司目前参与研究项目已经涵盖心脑血管、肿瘤、内分泌、生殖、免疫、神经等诸多领域。


为了响应大力发展基础研究的号召,推动生命科学领域的进步,伊莱博生物充分利用积累多年的科研资源优势,提供培训服务。通过实验理论培训和实践相结合,充分了解科学研究和实验操作的全过程,培训规范的实验操作、分析问题和解决问题的能力,分层次培养科研人才,为其今后的科研工作奠定坚实的基础。


因为专业,所以值得信赖;因为专注,所以高速发展;坚持“诚信创新,互利共赢”的原则;朝着“解决科研问题”这一目标,伊莱博人将通过自身的努力,与一线科研人员共同推动生命科学的快速发展!



详细信息

WB蛋白免疫印迹


Western Blot,即WB蛋白免疫印迹(免疫印迹试验),是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。

定义

SouthernNorthern杂交方法类似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶或同位素标记的第二抗体起反应,经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。该技术也广泛应用于检测蛋白水平的表达。

  

技术原理

Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE),被检测物是蛋白质,探针是抗体,显色用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品,转移到固相载体(如硝酸纤维素薄膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶或同位素标记的第二抗体起反应,经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。

 

应用领域

Western Blot技术广泛应用于生物医学研究和临床诊断中。它可以用于检测蛋白质的表达水平、研究蛋白质的功能和相互作用、鉴定蛋白质的修饰状态等。此外,它还可以用于研究疾病的发生机制、药物研发和生物标记物的筛选等领域。例如,在结直肠癌(CRC)的研究中,Western Blot被用于评估肿瘤相关抗原在肿瘤和非肿瘤组织样本中的表达情况,有助于疾病的早期诊断和预后评估。

 

实验步骤

Western Blot的实验步骤包括样品制备、电泳、转膜、封闭、一抗孵育、二抗孵育、显色和数据分析等。其中,转膜是将凝胶上的蛋白质转移到固相支持物上的关键步骤,常用的固相支持物有NC膜和PVDF膜。封闭是为了减少非特异性抗体与膜的结合,提高实验的特异性。一抗和二抗的孵育则是为了特异性地识别目标蛋白并进行显色。

 

注意事项

在进行Western Blot实验时,需要注意操作细节和实验条件的选择,以确保实验结果的准确性和可靠性。例如,转膜时应置于冰槽中以防止过热导致气泡形成1;封闭液的选择和封闭时间也需根据实验条件进行优化;一抗和二抗的选择和稀释比例也需根据实验目的和样品特性进行确定。

 

 

伊莱博生物拥有丰富的研究经验,具备完善的系统化管理能力和科研服务体系。目前已自建细胞、分子、病理等实验平台近1000平方米,拥有的仪器设备、细胞库、样本保存库等。动物实验中心近1800平方米,可满足同时饲养清洁级和SPF级动物。核心实验技术团队主要来自大学、复旦大学、上海交通大学等重点高校及科研机构,能够为客户提供研究方案策划、项目实施及项目深度分析等方面的技术支持。公司目前参与研究项目已经涵盖心脑血管、肿瘤、内分泌、生殖、免疫、神经等诸多领域。

 

 


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