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ELISA试剂盒定制服务
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生产厂家南京卡米洛生物工程有限公司,被行业内评为*企业,江苏实验室联盟企业。主要从事各种细胞因子酶联免疫试剂盒及其相关产品的研发,生产,销售和技术上的服务、培训与咨询。公司产品涉及许多生命科学研究领域,如胚胎学、血液学、免疫学和神经科学等等,特别是肿瘤研究领域。我们所研发的产品是致力于为中国生命科学研究领域的科学家们提供研究所需要的高品质产品,从而加速生物制药和生命医学市场的发展,提高疾病的诊断和治疗水平,以造福于*。公司一直致力于各种细胞因子及其相关产品的研发,生产和销售。卡米洛的产品覆盖面广,种类丰富,质量稳定可靠,其生产的各种ELISA试剂盒、重组因子及抗体以其*的品质赢得了广大科研院所及临床诊断机构的青睐。
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南京卡米洛生物工程有限公司,属于科研用ELISA试剂盒的生产、研发企业。专注于ELISA试剂盒的研发十多年,研发与生产能力值得信奈。
市面上现有的ELISA试剂盒有时可能满足不了老师的实验要求,因为我们可以根据老师的需求,灵活的进行研发,定制,生产。
以下是我们的试剂盒示例说明书,供您参考
本试剂盒采用双抗体夹心法,双抗体夹心原理,是基于要测试的抗原具有二价以上的特性,能识别包被抗体,同时能识别检测抗体,具体过程如下:
【人Asprosin酶联免疫试剂盒检测原理】
本实验采用双抗体夹心ELISA法。所提供的ELISA Kit是典型的夹心法酶联免疫吸附测定试剂盒(ELISA)。预先包被的抗体为抗人Asprosin单克隆抗体。检测相抗体为多克隆抗体,经生物素(biotin)标记。样品和生物素标记抗体先后加入酶标板孔反应后,PBS或TBS洗涤。随后加入过氧化物酶标记的亲和素反应;经过PBS或TBS的*洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的待测因子呈正相关。
【人Asprosin酶联免疫试剂盒检测原理示意图】
【试剂盒组成】
名称 96 Tests 48 Tests 保存条件
1.人Asprosin抗体包被板条 8×12 8×6 4/-20℃
2.人Asprosin标准品 2 支(冻干) 1 支(冻干) 4/-20℃
3.浓缩生物素化人Asprosin抗体 1支 1 支 4/-20℃
4.浓缩酶结合物(ABC) 1支 1 支 4/-20℃
5. 酶结合物(ABC)稀释液 1瓶 1瓶 4/-20℃
6.抗体稀释液 1瓶 1 瓶 4/-20℃
7.标准品稀释液 1瓶 1 瓶 4/-20℃
8.样品稀释液 1瓶 1 瓶 4/-20℃
9.浓缩洗涤液 1 瓶(25×) 1 瓶(25×) 4/-20℃
10.显色剂A 1 瓶 1 瓶 (避光) 4/-20℃
11.显色剂B 1 瓶 1 瓶 4/-20℃
12.终止液 1 瓶 1 瓶 4/-20℃
13.说明书 1 份 1 份 室温
【试验所需自备试验设备和器材】
【试验所需自备试验耗材及试剂】
【标本收集注意事项】
【标本处理办法】
心10分钟,取上清立即测试,暂时不测可以放入-20℃(1-3个月)或-80℃(3-6个月)
保存。
注:样品稀释的一般原则
用户须查阅相关文献了解标本内待测因子的含量,决定适当的稀释倍数,以使稀释后样品中待测因子的浓度处于ELISA试剂盒的佳检测范围。样品的稀释应有详细记录。
【注意事项】
【检测前准备工作】
1. 请提前20分钟从冰箱中取出试剂盒,平衡至室温后方可进行试验。
2. 将浓缩洗涤液用双蒸水稀释(1:25)。未用完的放回 。
3. 人Asprosin标准品: 加入标准品稀释液1.0ml至冻干人Asprosin标准品中,静置10分钟,待其充分溶解后,轻轻混匀(浓度为10 ng/ml),之后在管身标注①,然后根据需要进行稀释。(建议标准曲线使用以下浓度:10、5、2.5、1.25、0.625、0.312、0.156 ng/ml)。 注意:务必要保证冻干标准品*溶解和混匀。
4. 标准品稀释方法图例: 取7支洁净的试剂管,分别标注②,③,④,⑤,⑥,⑦,⑧. 每管加入300μl标准品稀释液。从第①管内取出300μl加入到第②管,混匀后,再从第②管取出300μl加入到第③管,以此类推至第⑦管。第⑧管为标准品稀释液,作为阴性对照使用。
注:复溶标准品原液(10 ng/ml)请废弃,不可重复使用。
5.生物素化人Asprosin抗体工作液:按当次试验所需用量,用抗体稀释液稀释浓缩生物素化抗体(1:100),配置成生物素化抗体工作液。使用前30分钟准备。仅供当日使用。
6.酶结合物工作液:按当次试验所需要用量,用酶结合物稀释液稀释浓缩酶结合物(1:100),配置成酶结合物工作液。使用前30分钟准备。仅供当日使用。
7.TMB显色工作液:在使用之前30分钟,按TMB显色液A 9份加 TMB显色液B 1份(9:1)的比例配制TMB显色工作液。
【洗涤方法】
1.自动洗板机:要求注入的洗涤液为350μl,注入与吸出间隔20-30秒。确保机器运用熟练后,再投入实验中使用。
2.手工洗板:每孔加洗涤液350μl,静置30秒后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干。手工洗板时,注意加入洗液的过程中,不要造成孔间污染,从而出现跳孔的现象。
【操作步骤】
【结果判断】
1.每个标准品和标本的OD值应减去零孔的OD值。(若不减零孔值,标准曲线的零孔应相交于Y轴)
2.手工绘制标准曲线。以标准品浓度作横坐标,OD值作纵坐标,以平滑线连接各标准品的坐标点。通过标本的OD值可在标准曲线上查出其浓度。使用专业制作曲线软件进行分析,如curve expert 1.3进行结果计算。
3.若标本OD值高于标准曲线上限,应适当稀释后重测,计算浓度时应乘以稀释倍数。
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线来计算标本含量。
【操作程序总结】
准备试剂,样品和标准品
加入准备好的样品和标准品,37℃反应90分钟
洗板2次,加入生物素化抗体工作液,37℃反应60分钟
洗板3次,加入ABC工作液,37℃反应30分钟
洗板5次,加入TMB显色液,37℃反应
加入TMB终止液
10分钟之内酶标仪测OD值
计算标本待测因子含量
、试剂盒参数
【检测范围】10ng/ml-0.156ng/ml
【灵敏度】min可测人Asprosin达0.05ng/ml.
【特异性】系统和其它因子无交叉反应。
【批间差】≤12%.
【批内差】≤8%.
【回收率】70-110%.
【保存】-20℃ [短期内(如两周)可4℃]
【用途】用于体外定量分析液体标本(通用型)。
【规格】96T.
【生产日期】见酶标板铝箔袋封口钢印。
【有效期】12个月(-20℃).