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LX3614 ER-Tracker Red (BODIPY® TR Glibenclamide), fo
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产品信息
货号 | 名称 | 规格 | 价格 |
LX3614 | ER-Tracker Red (BODIPY® TR Glibenclamide), for live-cell imaging内质网红色荧光探针 | 20µl (1mM) | 1680 |
产品简介
ER-Tracker探针是一系列具有细胞膜透过性,对活细胞内质网具有高度选择性的探针,不像传统的DiOC6(3),该系列探针几乎不对线粒体着色,且在较低浓度即可实现对内质网的染色,且对细胞几乎无毒性。使用以下提供的优化步骤对活细胞染色后用醛固定,可以部分保留活细胞的染色特征。
本品为ER-Tracker Red (BODIPY® TR Glibenclamide),由红色荧光染料BODIPY® TR和 Glibenclamide 偶联而成,其Ex= 587 nm,Em= 615nm。Glibenclamide, glyburide,一种常用降血糖药物,在胰岛β细胞、胰岛素的分泌、心肌衰竭细胞功能以及心律不齐的研究等方面具有重要科研用途。高度结合ATP-敏感型K+通道的磺脲受体,且本受体富集存在内质网上,因此适合用作内质网荧光探针。
本品为溶于DMSO的1mM ER-Tracker Red (BODIPY® TR Glibenclamide)储存液,推荐工作浓度为~1μM。
产品性质
分子式(Formula):C44H42BClF2N6O7S2
分子量(Molecular Weight):915.23
外观(Appearance):液体
Ex/Em:587/615nm
滤片(Filter):TRITC
步骤说明
本实验方案经牛肺动脉内皮细胞优化,且已被其他常规细胞系验证。但不同的细胞类型其*使用条件不同,还需用户根据该方案进行进一步优化。
1. 试剂准备
使用前将ER-Tracker Red (BODIPY® TR Glibenclamide)回温至室温,并简短离心使该DMSO溶液至管底。
2. 细胞样品处理及染色
2.1 将1mM ER-Tracker Red (BODIPY® TR Glibenclamide)储存液按照实验要求稀释至工作浓度,推荐工作浓度为~1µM。建议在不影响实验结果的前提下尽量使用较低浓度探针,以避免由于浓度过高染色导致的假象。
注:使用含Ca2+、Mg2+ Hank’s (HBSS/Ca/Mg)稀释该探针进行染色,可得到*实验结果。
2.2 染色
对于贴壁细胞,吸除培养皿中培养基,用HBSS清洗细胞,加入预热的染料工作液于37℃孵育细胞15-30min。吸除染色液,加入不含探针的新鲜培养液,并在荧光显微镜下观察细胞。
细胞如需固定,请参考以下步骤。
3.细胞固定
3.1 固定细胞:用4%甲醛于37℃固定细胞2min。
【注】:已染色细胞用醛固定后,仅部分ER-Tracker Red (BODIPY® TR Glibenclamide)留在细胞内,荧光信号会有部分衰减。
3.2 清洗观察细胞:细胞固定后,可用合适缓冲液进行清洗,每次5min,共2次。清洗后可对细胞进行后续封片、镜检或进一步染色。
【注】:不建议对细胞进行透化处理,因为经Triton X-100透化后,无信号保留。
注意事项
1)不能储存在无霜冰箱,建议按照单次用量分装于-20℃冻存。
2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
运输和保存方法
冰袋运输。-20℃避光干燥保存,避免反复冻融,有效期6个月。
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