脑膜炎细菌多重PCR检测试剂盒厂家
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50T 脑膜炎细菌多重PCR检测试剂盒厂家

型号
50T
上海联祖生物科技有限公司

高级会员6年 

代理商

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上海联祖生物科技有限公司成立于2020年,坐落于中国魔都上海,提供生物试剂、免疫试剂、生化试剂、实验仪器及耗材、制药工业及原料、细胞培养试剂和科研诊断等各类科研产品,供应于生命科学基础开发研究、疾病诊断与制药、生物技术、卫生与健康等诸多领域。


本着“质量至上、服务至上”的理念,公司范围涉及全国所有省市自治区,为广大科研用户提供专业、高效及优质的产品及服务!


本司产品仅用于科研,不用于临床诊断和治疗!






详细信息

组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。

 产品名称

 脑膜炎细菌多重PCR检测试剂盒厂家

 规格

 50T

 货号

 LZP7702

实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。
3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
4.PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水,采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
5.试剂都应该以大体积配制,试验一下是否满意,然后分装成仅够一次使用的量储存,从而确保实验与实验之间的连续性。
6.试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
7.PCR的样品应在冰浴上化开,并且要充分混匀。检测步骤:
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
1) 计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
六偏酸钠SimpleChIP® Mouse MEST Intron 1 Primers1-基-金刚烷

无脂肪酸牛血清白蛋白SignalSlide® NF-κB p65 IHC Controls2,4,6-*基-2,4,6-三基环三硅氧烷

二羟基酮(>97%,BR)SignalSilence® Sharpin siRNA I4,10-二氮杂-15-冠5-

心肌黄酶(>30U/mg,BR)DyLight™ 594 Phalloidin三基烷

水溶毛地黄皂苷IRS-1 Inhibition Antibody Sampler Kit羟基-硝基吡啶

DSPPAF1 (D9G9X) Rabbit mAb2,二-5,6-*基嘧啶

二四酸二钠一镁盐Phospho-Tau (Thr181) (D9F4G) Rabbit mAb酸环己酯

谷氨酸脱氢酶Merlin (D3S3W) Rabbit mAb2-溴-氟甲

对羟基三唑hERG1a (D1Y2J) Rabbit mAb氟-羟基甲

亚氨基二酸(>98%,BR)SIX1 (D4A8K) Rabbit mAb6-溴烟酸甲酯

二氧化铅(>98%,BR)SCAI (D9A7Y) Rabbit mAb二基二酸二酯

DL-酸锂(>98%,BR)USP Antibody Sampler Kit2,二甲基咪唑

式碳酸镁五水(>98%,BC)Merlin (D6N8H) Rabbit mAb1-甲基-吲哚酸

二氧化锰(>97.5%,BC)ADAMTS1 (D5G4Z) Rabbit mAb2,二氟

1,二基脲(>98%,BR)SimpleChIP® Human HSP90β Promor Primers2-甲硫基

聚二600Dab2 (D7O9T) Rabbit mAb甲硫基-2-丁酮

普鲁士兰(>98%,BS)PathScan® Phospho-FGF Receptor 1 (panTyr) Sandwich ELISA Kit多肽试剂 U

派洛宁B(Ind)IL-6 (D5W4V) XP® Rabbit mAb (Mouse Specific)2--氨基

甲状旁腺激素(PTH)ELISA试剂盒phospho-Pyk2 (Tyr881)  酸化富含脯氨酸的酪氨酸激酶2100 ul

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