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PHY4352S 水稻OscpSRP43抗体
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- PHY4352S
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详细信息
OscpSRP43参与水稻叶绿体正常发育以及光合作用，OscpSRP43组成性表达，包括根、茎、叶、叶鞘以及穗，在叶片表达量最高。
针对OscpSRP43蛋白PhytoAB研发了PHY4352S。PHY4352S的免疫原为Os03g0131900的一段多肽序列，确定反应物种: Oryza sativa。WB结果如下图：
首先研究了cpSRP43突变株（chaos）中的TBS蛋白的含量，发现叶绿素合成限速酶-谷氨酰-tRNA 还原酶 (GluTR)，镁离子螯合酶 (MgCh) 的催化亚基CHLH以及MgCh的激活子GUN4的含量显著下降，表明cpSRP43能够保护GluTR, CHLH 和GUN4的稳定性。生物荧光互补实验（BiFC）和体外Pull down实验证实了它们之间的相互作用。为了弄清楚cpSRP43是如何保护TBS蛋白的稳定性，研究人员进行了体外的蛋白散射分析（Scattering assay），发现cpSRP43能保护TBS蛋白避免在高温下形成聚集失活。体内实验，研究人员将野生型和chaos在高温（42 °C）下处理后检测cpSRP43对于TBS的热保护作用，发现缺失了cpSRP43的突变体中TBS蛋白稳定性下降，叶绿素的合成相比野生型下降明显，进一步证实了cpSRP43对于TBS蛋白的热保护作用。
叶绿体信号识别粒子 (cpSRP)由亚基 cpSRP43 和 cpSRP54 组成，之前已经知道cpSRP43和cpSRP54形成异源二聚体介导捕光天线蛋白（LHCP）在叶绿体内的运输和膜整合并且cpSRP54能够促进cpSRP43去保护LHCP免于聚集失活【4】。在本研究中，研究人员在蛋白散射分析中添加cpSRP54，惊奇地发现cpSRP43对于TBS蛋白的热保护作用被大大削弱，表明与对LHCP的情形相反， cpSRP54抑制cpSRP43对TBS蛋白的保护作用。为了弄清楚cpSRP54是如何在促进/抑制的两种角色中转换的，研究人员研究了温度对于cpSRP43-cpSRP54互作的影响，发现高温削弱了 cpSRP54 与 cpSRP43 的相互作用，从而释放cpSRP43与TBS蛋白互作并保护TBS蛋白。
上样蛋白分别为5 μL水稻叶绿体蛋白(Os-Chl);
一抗稀释比例: 1: 5000.
