脂肪间充质干细胞成软骨诱导分化试剂盒

首页>实验室仪器设备-热搜分类>实验器材|实验室家具>试剂柜

脂肪间充质干细胞成软骨诱导分化试剂盒

型号

该企业相似产品

天根DNA纯化试剂盒-DP205

在线询价

新生牛血清

在线询价

南美胎牛血清-​细胞/病毒筛选​用

在线询价

天根试剂-GeneRed核酸染料-RT211

在线询价

DMEM培养基​高糖

在线询价

人脐带间充质干细胞诱导分化试剂盒

在线询价

骨髓间充质干细胞成骨诱导分化培养基

在线询价

人结肠癌细胞HCT116​​

在线询价
细胞反应器
苏州阿尔法生物实验器材有限公司成立于2008年,12年专注生物实验室仪器设备和耗材供应,迄今为止已服务1000+客户。主要代理的仪器包括振荡培养箱,PCR仪,移液器,生物反应器,发酵罐,移液器,超低温冰箱,医用冰箱,液氮罐,高压灭菌器,超纯水机,天平,离心机等。厂商企业包括知楚仪器、朗基、中科美菱,梅特勒,乐枫,搏旅、NEST、天根、奥盛等在内等多家品牌;在提供产品的同时也为您提供生物实验室常用的耗材试剂,以及实验室整体搬迁、第三方检测、计量与校准,二手仪器调剂等服务。完整的实验室一站式体验使您的选择更加方便、快捷、灵活。

详细信息

脂肪间充质干细胞成软骨诱导分化试剂盒

脂肪间充质干细胞成软骨诱导分化试剂盒规格脂肪间充质干细胞诱导分化成软骨试剂

质检标准 pH:7.2~7.4 

内毒素含量:<10 EU/mL 

生物安全:细菌、真菌、支原体检测阴性 

质量检测:诱导测试合格

| 检验原理 

阿利辛蓝广泛用于酸性多糖的染色,如软骨 或组织中的糖胺聚糖和细胞分泌的外被多糖的 染色等。干细胞在诱导培养基的作用下,会逐渐 向软骨细胞方向分化。软骨细胞外具有一层富含 蛋白多糖的基质,是成软骨分化的标志物,可被 阿利辛蓝染成蓝绿色。


 脂肪间充质干细胞成软骨诱导分化试剂盒使用说明

 成软骨诱导分化操作(平面诱导) 

1. 细胞分化诱导 

将对数生长期的细胞消化下来计数,成软骨 诱导分化培养基诱导液重悬细胞,离心后调整细 胞密度密度1.0~2.0×10e7cells/mL。 吸取20 μL细胞悬液(约2.0~4.0×10e5个细胞) 悬滴至24孔板。置于37℃,5% CO2培养环境 下培养2~3 h使细胞贴壁。 2~3 h后补充1 mL成软骨诱导分化培养基诱 导液正常培养。每隔2~3天换液一次。按照以上 换液频率诱导21~28天,并注意观察细胞形态变 化。 

2. 染色鉴定 

2.1 细胞固定 吸去培养基使用适量 1×PBS 清洗一次,弃去 后取适量 4%中性覆盖培养器皿底面,室 温固定 30~60 min 后,弃去固定液再使用 1×PBS 清洗两次。

 2.2 阿利辛蓝染色 向清洗干净的诱导孔内加入适量染色液,避 光静置染色 30 min。 吸去阿利辛蓝染色液,用 1×PBS 清洗两次, 并加入适量 1×PBS 避免细胞干燥。

 2.3 诱导评估 显微镜下观察成软骨染色效果,并进行图像 采集和诱导评估。诱导成功时,软骨组织中的内 酸性粘多糖可被阿利辛蓝染成蓝绿色。


  成软骨诱导分化操作(三维培养)

 1. 干细胞的准备 

将对数生长期的细胞消化下来计数,取 3×10e5 个细胞转移到 15 mL 离心管中,250 g 离 心 4 min。 弃上清,加入 0.5 mL 成软骨诱导分化培养基 预混液,重悬细胞,150 g 离心 5 min。小心弃去 上清,加入 0.5 mL 成软骨诱导分化培养基诱导 液,重悬细胞,150 g 离心 5 min。 将 15 mL 离心管的管盖稍稍旋开,放置于 37℃,5% CO2培养环境下培养。

 2. 细胞分化诱导 

24 h 后观察细胞沉淀形变团聚的情况,如有 明显的变化,则小心轻柔地拨动管底,尝试让细 胞团脱离管底,全部浸润在诱导液中。 置于 37℃,5% CO2培养环境下培养约 21 天, 通常每 2 天更换一次新鲜配制的成软骨诱导分化 培养基诱导液。注意观察细胞团成球情况及表面 光滑度,决定终止细胞诱导的时间,并进行染色 鉴定。

 3. 染色鉴定 

3.1 软骨球固定 将软骨球从离心管中转移至 EP 管,并使用 1 ×PBS 清洗两次,最后置于适量的 4%中性中。

 3.2 石蜡包埋切片 软骨球经石蜡包埋后切片。 

3.3 阿利辛蓝染色 将石蜡切片脱蜡和脱水,使用阿利辛蓝染色 液染色 30 min,用自来水冲洗 2 min,蒸馏水冲 洗 1 次。 

3.4 诱导评估 显微镜下观察成软骨染色效果,并进行图像 采集和诱导评估。诱导成功时,软骨组织中的内 酸性粘多糖可被阿利辛蓝染成蓝绿色。 

脂肪间充质干细胞诱导成软骨

NOTE: 干细胞的成软骨分化水平因细胞类型、细胞供体 来源,培养条件、细胞代次、细胞状态和分化时间等因素而异。

尊敬的访客:

当您来到这个页面时,您已成为我们最尊贵的客户,苏州阿尔法生物实验器材有限公司真诚欢迎您的到来!

联系我们
免费服务电话:十三年专注于生物实验室仪器供应

同类产品推荐

相关分类导航

产品参数

在线询价 在线询价
当前客户在线交流已关闭
请电话联系他 :