加入硫酸终止液可以将颜色变为黄色，从而通过使用分光光度计或酶标仪在 450 nm 处实现准确的强度测量。该特定配方用于大多数 Thermo Scientific Pierce ELISA 试剂盒，从而可以为三明治 ELISA 技术提供一致的性能。

TMB 底物溶液的特点：

•产品编号：N301
• 规格：100 mL（足够用于约 10 个 96 孔微孔板）
• 储存：置于冷袋上运输。接收后立即在 2-8°C 下储存。请勿使用超过失效日期的产品。
•应用：ELISA：推荐用于基于过氧化物酶的免疫检测。氧化后，TMB 形成一种水溶性蓝色反应产物，可以通过分光光度法在 605 nm 处测量。酸化后，反应产物变为黄色，吸光度峰位于 450 nm。
•注意事项：本产品对来自各种氧化剂的污染敏感。为了避免污染和过早失效，请避免将 TMB 溶液接触任何潜在的污染来源。切勿直接用移液器从瓶中吸取。将所需量倒入试管中并用移液器从试管中吸取。不要将多余的 TMB 倒回初级储存容器。

程序：
•向每个含过氧化物酶反应液的孔中加入 100 µL TMB 底物。
•室温孵育 15 至 30 分钟。
•向各孔中加入 100 µL 终止液（0.16 M 硫酸，N600）。
•在 450 nm 处测量吸光度。