糖尿病肾病模型构建
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伊莱博生物科技(上海)有限公司(简称,伊莱博生物),总部位于上海市长江软件园,2024年1月与上海大学医学院成立联合研究中心,是一家以生命科学研究为基础,专注于研究成果转化及技术服务的创新型高科技企业。主要致力于为科研人员及机构提供专业的技术团队和实验平台,建立包含肿瘤生物学、病理学、免疫学、细胞生物学、生物化学与分子生物学和动物实验等学科的研究服务体系。
伊莱博生物拥有丰富的研究经验,具备完善的系统化管理能力和科研服务体系。目前已自建细胞、分子、病理等实验平台近1000平方米,拥有的仪器设备、细胞库、样本保存库等。动物实验中心近1800平方米,可满足同时饲养清洁级和SPF级动物。核心实验技术团队主要来自中国科学院大学、复旦大学、上海交通大学等重点高校及科研机构,能够为客户提供研究方案策划、项目实施及项目深度分析等方面的技术支持。公司目前参与研究项目已经涵盖心脑血管、肿瘤、内分泌、生殖、免疫、神经等诸多领域。
为了响应大力发展基础研究的号召,推动生命科学领域的进步,伊莱博生物充分利用积累多年的科研资源优势,提供培训服务。通过实验理论培训和实践相结合,充分了解科学研究和实验操作的全过程,培训规范的实验操作、分析问题和解决问题的能力,分层次培养科研人才,为其今后的科研工作奠定坚实的基础。
因为专业,所以值得信赖;因为专注,所以高速发展;坚持“诚信创新,互利共赢”的原则;朝着“解决科研问题”这一目标,伊莱博人将通过自身的努力,与一线科研人员共同推动生命科学的快速发展!
一、糖尿病肾病背景简介
糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN) 是糖尿病主要的慢性并发症之一,也是导致终末期肾病的主要原因。控制血糖及血压能够减缓糖尿病患者向终末期肾病转化,但目前临床上尚缺乏新的治疗方法医治糖尿病肾病。建立适当的动物模型,可以为研究DN的病因、发病机制和病理生理改变提供重要的线索,同时也为临床治疗DN提供理论依据。
二、糖尿病肾病模型简介
糖尿病肾病模型是用于研究糖尿病肾病发病机制、病理生理改变以及评估治疗方法的工具。这类模型主要分为诱发性模型、自发性模型和基因工程小鼠模型。
三、糖尿病肾病模型构建方法
1. 实验动物
SD大鼠 200g左右
2. 实验材料
高脂饲料,STZ,柠檬酸钠缓冲液
3. 化学药物诱导DN模型制备流程
适应性饲养7天后,将普通饲料更换为高脂饲料,继续饲养8周后,禁食不禁水12h,记录小鼠的体重和空腹血糖值。根据小鼠体重,腹腔注射STZ溶液,造模7天后,尾部取血测量空腹血糖。若血糖值≥11.1mmol/L视为糖尿病造模成功。继续给予糖尿病小鼠高脂饲料饲养4~8周。随病程延长,后期可出现肾间质小血管玻璃样变等肾小管及间质病理改变,模型鼠尿蛋白排泄率增加。
4. 模型验证
1、实验结束前1天,用代谢笼收集24h尿蛋白、尿肌酐。次日以1%戊bbt纳麻醉,从心脏采血,检测血肌酐、血尿素氮等指标。并按照公式计算内声肌酐清除率(Ccr=尿肌酐/血肌酐*24h尿量)。
2、肾组织病理学检测:处死大鼠取右肾,4%多聚甲醛固定,乙醇逐级脱水,石蜡包埋切片,常规HE及PAS染色,树胶固封,光镜下观察肾小球毛细血管丛呈分叶状,细胞外基质增多,系膜区扩大。
四、小结
人类糖尿病以2型占多数,因此建立理想实用的2型糖尿病动物模型,对其发病机制及其慢性并发症的研究具有重要意义。高糖高脂+小剂量STZ造成DM模型,然后依其自然病情发展成DM模型。
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