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jinkou Nylon Wool Fiber T细胞分离尼龙毛柱
- 型号
- jinkou
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海德创业(北京)生物科技有限公司，简称海德生物。它的诞生，缘于几个不甘寂寞、立志在生物领域做出一番事业的年轻人。共同的理想、共同的目标，使大家凝聚在海德创业的旗帜之下，认认真真做事，老老实实做人。
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详细信息
尼龙毛是免疫学中用于分离T细胞的产品。在研究体内及体外的免疫系统时，分离淋巴细胞群是一个关键步骤，而市场上并没有针对B细胞的特异性抗血清，所以分离淋巴细胞中的T细胞有些麻烦。T细胞尼龙毛分离法利用了尼龙毛对B细胞的吸附力，从而使T细胞在没有严重损伤的情况下达到的足够的纯度。该方法不像流式和磁珠那样费用昂贵，而且操作简便，所需要的条件也不高，是一种非常实用的方法。
操作方法：
1.秤取1.5g尼龙毛柱装入20-30ml玻璃容器或注射器内，填料的体积控制在15毫升左右。因为尼龙毛的松紧关系到T细胞的回收率，所以要特别注意。注射器下端配接5厘米左右长的带有弹簧夹的橡皮管。
2. 加入大量的PBS平衡柱子后，用铝箔包裹，并置于适当的容器内，高压灭菌15分钟。
（商品化尼龙毛柱以上步骤可以省略，经过PBS平衡后可以直接进行下列步骤。）
3. 灭菌的尼龙毛柱垂直固定后放于超净台内，顶部以铝箔覆盖，避免污染。
4. 注射器下端，橡皮管，弹簧夹用*消毒。打开弹簧夹调节流速在大约3-4ml/min。
5.首先，加入3-4倍柱体的无血培养基平衡，之后加入相同体积的含有血清的培养基平衡（上述培养基都要预热），zui后等培养基液面接近柱填料液面时，关闭弹簧夹。
6. 样本细胞悬浮液浓度控制在约5×108cells/ml，上样量一般是1/3-1/5柱体积。样品加入之后，再加入少量培养液，然后关闭弹簧夹。
7.覆盖铝箔，垂直固定，置于消毒过的容器中，于培养箱内37℃孵育1小时。此过程中柱子必须要保持垂直状态。
8. 从培养箱中拿出柱子，置于超净台内，除去铝箔。接上按照4.中的方法消毒的弹簧夹和橡皮管，加入适当体积经37℃预热的培养基，打开弹簧夹控制流速在3-4 mL/min，流出约5ml之后，流出的培养液基变得不透明，此时其中含有T细胞，收集这一部分培养基。
9. 基本上何时结束收集取决于流出液体中细胞的浓度，实际上，收集的量达到一个柱体积时就可以停止收集，因为即使收集更多的量，回收率几乎不会增加。
10.上述操作后，细胞的
回收率为： 15~20 ％
T细胞含量： 85~95 ％
B细胞污染率： 1 5 ％
多数细胞被确定为T细胞。
（注）收集粘附于尼龙毛上的细胞时，将T细胞收集完毕后的尼龙毛再无菌操作的状态下取出，转移到适当的容器中，用镊子小心的将尼龙毛松开，粘附的细胞可以洗到培养基中。或者将注射器芯插入注射器内，通过压力使的粘附的细胞随着液体流出。
订货信息
| 货号 | 产品名称 | 规格 |
| 18369-50 | 尼龙毛 | 50g |
| 18369-10 | 尼龙毛 | 10g |
| 21759-1 | 尼龙毛柱 预装好 | 10支 |
