大鼠滋养层干细胞
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参考价:¥9003800/瓶

大鼠滋养层干细胞

型号
参数
规格:5×105Cells/T25培养瓶 组织来源:胎盘组织 货号:CS-X3280 细胞形态:成纤维细胞样
上海莼试生物技术有限公司

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详细信息

产品信息:

货号

CS-X3280

组织来源

胎盘组织

传代特性

可传3代左右

培养基

FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

细胞形态

成纤维细胞样

生长特性

贴壁

培养条件

气相:空气,95%;CO2,5%

换液频率

2-3天换液一次

大鼠滋养层干细胞

商品介绍:

产品名称:大鼠滋养层干细胞
2.组织来源:胎盘组织

3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶

4.细胞简介:

大鼠滋养层干细胞分离自胎盘组织;胎盘(placenta)是哺乳动物妊娠期间由胚胎的胚膜和母体子宫内膜联合长成的母子间交换物质的过渡性器官,由羊膜、叶状绒毛膜和底蜕膜构成。胎儿在子宫中发育,依靠胎盘从母体取得营养,而双方保持相当的独立性。胎盘还产生多种维持妊娠的激素,是一个重要的内分泌器官。有些爬行类和鱼类也以胎生方式繁殖后代,胚胎生长出一些辅助结构如卵黄囊、鳃丝等与母体组织紧密结合,以达到母子间物质的交换,这样的结构称假胎盘。滋养层干细胞是胎盘组织细胞的祖细胞,与胚胎着床和胎盘的形成密切相关。胚胎着床和胎盘形成是母体与胎儿建立联系的关键时期,此时期滋养层细胞增殖速度快,滋养层干细胞自我更新和分化旺盛,与多种妊娠相关疾病的发生、发展及其增殖、功能调节的失常有密切关系。在哺乳动物胚胎发育过程中,胚胎细胞第一次分化形成内细胞团和滋养外胚层。滋养层干细胞是胎盘细胞的前体细胞,在胎盘发育中有重要作用。

5.方法简介:

公司实验室分离的大鼠滋养层干细胞采用囊胚组织贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。

6.质量检测:

公司实验室分离的大鼠滋养层干细胞HLA-E(白细胞抗原)免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

7.培养信息:

培养基 FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传3代左右

消化液 0.25%yi蛋白酶

培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%

细胞保存方法:

(一)细胞冻存

1. 配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的冻存培养液;

2. 取对数生长期的细胞,去除旧培养液,用PBS清洗。

3. 去除PBS,加入适量(覆盖培养皿表面)把单层生长的细胞消化下来;

4. 离心1000rpm,5min;

5. 去除,加入适量配制好的冻存培养液,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,计数,调节冻存液中细胞的最终密度为5×106/ml~1×107/ml;

6. 将细胞分装入冻存管中,每管1~1.5 ml;

7. 在冻存管上标明细胞的名称,冻存时间及操作者;

8. 冻存:标准的冻存程序为降温速率-1~-2℃/ min;当温度达-25℃以下时,可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃时,则可迅速浸入液氮中。也可将装有细胞的冻存管放入-20℃冰箱2h ,然后放入-70℃冰箱中过夜,取出冻存管,移入液氮容器内。

大鼠滋养层干细胞

注意事项:

1)、欲冷冻保存之细胞应在生长良好且存活率高之状态,约为80~90%致密度。冷冻前检测细胞是否仍保有其性质,应在冷冻保存前一至二日测试是否有抗体之产生。

2)、细胞在液氮中可长期冻存无,而不会影响细胞活力;在-70度可保存数月。

3)、注意冷冻保护剂之品质。DMSO应为试剂级等级,无菌且无色(以0. 22micron FGLP Telflon过滤或是直接购买无菌产品,如Sigma D-2650),以5~10 ml小体积分装,4 ℃避光保存,勿作多次解冻。Glycerol亦应为试剂级等级,以高压蒸汽灭菌后避光保存。在开启后一年内使用,因长期储存后对细胞会有毒性。本方法中先制备双倍冻存液,可避免DMSO直接加入时释放的热量对细胞的损伤。缓慢逐滴加入细胞悬液是使细胞逐步适应高渗,可降低细胞受损。DMSO可能引起部分白血病细胞株的分化,可换用10%甘油冻存。

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操作步骤:

1)、冷冻前24-48小时更换半量或全量培养基,使细胞处于指数生长期。

2)、配制冷冻保存溶液(使用前配制):另取一离心管,加入培养基、血清,逐滴加入二甲基亚砜 (DMSO)至20%浓度,即制成双倍的冻存液,置于室温下待用。

3)、离心收集培养之细胞,用加血清的培养基重悬起细胞,取少量细胞悬浮液(约0. 1 ml)计数细胞浓度及冻前存活率。

4)、取与细胞悬液等量的冻存液,缓慢逐滴加入细胞悬液,并晃动试管,制成细胞冻存悬液(DMSO后浓度为5~10%),使细胞浓度为1~5×106cells/ ml,混合均匀,分装于已标示之冷冻保存管中,1~2 ml/vial,并取少量细胞悬浮液作污染检测。严密封口后,注明细胞名称、代数、日期。然后进行冻存。

 


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规格 5×105Cells/T25培养瓶
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