分光光度计的使用及原理介绍
时间：2014-07-31 阅读：2430
1、环境温度在条件容许的情况下，尽量保持在15-30摄氏度之间，这样能保持电器件稳定工作，不易老化，使分光光度计不易损坏，灯源的使用寿命得到延长。若条件不容许，在高温的情况下，缩短开机时间，使用分光光度计，使电器件不要长期保持在高温下。在低温下，使预热时间比常温下的预热时间要长，这样能保证在仪器稳定的情况下进行测试。
2、环境湿度在条件容许的情况下，尽量保持在60%以下，这样能保证光度计内部的光学件和电器件不易受潮、腐蚀、和上霉。若条件不容许，在高湿度和低湿度的情况尽量保持通风。
3、环境在条件容许的情况下尽量保持洁净，打扫环境时动作不宜太大，不要扬起灰尘，打扫之前用防尘罩盖上分光光度计，不要让灰尘进入分光光度计内部。
分光光度计类型，及应用领域：
分光光度计有哪几种不同的分类方式：
1.分光光度计按照波长及应用领域的不同可以分为：
（1）可见光分光光度计：测定波长范围为400～760nm的可见光区;
（2）紫外分光光度计：测定波长范围为200～400nm的紫外光区;
（3）红外分光光度计：测定波长范围为大于760nm的红外光区;
分光光度计zui常见的用途和常用波长：
1.核酸的定量
核酸的zui高吸收峰的吸收波长260nm。利用260nm的波长可以定量测量溶于缓冲液的寡核苷酸，单链、双链DNA，以及RNA的浓度。
除了核酸浓度，分光光度计同时显示几个非常重要的比值表示样品的纯度。如A260/A280的比值，用于评估样品的纯度，因为蛋白的吸收峰是280nm。纯净的样品，比值大于1.8（DNA）或者2.0（RNA）。如果比值低于1.8或者2.0，表示存在蛋白质或者酚类物质的影响。
A230表示样品中存在一些污染物，如碳水化合物，多肽，*等，较纯净的核酸A260/A230的比值大于2.0。
A320检测溶液的混浊度和其他干扰因子。纯样品，A320一般是0。
2.蛋白质的直接定量
这种方法是在280nm波长，直接测试蛋白。选择Warburg公式，光度计可以直接显示出样品的浓度，或者是选择相应的换算方法，将吸光值转换为样品浓度。
3.细菌细胞密度
细菌培养过程中，需要采用分光光度计准确测定细菌细胞密度。
OD600是追踪液体培养物中微生物生长的标准方法。在600nm波长下，以未加菌液的培养液作为空白液，测量定量培养后的含菌培养液。
（4）荧光分光光度计：用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光谱;
（5）原子吸收分光光度计：光源发出被测的特征光谱辐射，被经过原子化器后的样品蒸气中的待测元素基态原子所吸收，通过测定特征辐射被吸收的大小，来求出被测元素的含量。
2.分光光度计按自动化程度分类：可分为手动、半自动、自动分光光度计。
3.分光光度计按软件可分为：带扫描、不带扫描。