QGY-7701肝癌细胞

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2016-08-23 16:22:52
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产品简介

QGY-7701肝癌细胞ATCC株 询价

详细介绍

QGY-7701肝癌细胞上海谷研科技有限公司的原代细胞株及血清,ATCC细胞株、hyclone澳洲特级胎牛血清,优等胎牛血清,标准胎牛血清,gibco特优级胎牛血清血清,新生牛血清。
细胞术检测样品制备方法
直接标记抗体(FITC标记抗体)QGY-7701肝癌细胞
(1) 收集1×106个细胞,800rpm离心5min,4℃以上冷PBS洗一次。
(2) 用4%多聚甲醛1ml室温固定40分钟,800rpm离心5min去上清。加2ml PBS重悬洗涤细胞,800rpm离心5min。
(3) 用1ml含5% 人血清的 PBS 重悬细胞,冰上孵育10min,800rpm离心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和饱和剂量的荧光标记抗体(5×105个细胞/20ul抗体)的PBS ,避光冰上放置30min,离心弃上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定,待测即可。
(4) 用流式细胞仪检测荧光值,每管计数10 000个细胞。[2]
未标记抗体间接免疫荧光标记法:
(1)收集2×106个细胞,用冷的PBS 2ml 洗涤细胞一次,800rpm离心5min。
(2)用2ml 4%多聚甲醛室温固定细胞40min,800rpm离心5min;2ml PBS重悬细胞,800rpm离心5min;
(3)用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重悬细胞,冰上放置10min,800rpm离心5min。
(4)加入饱和剂量未标记抗体,冰上放置40min,800rpm离心5min,用2ml冷的PBS 重悬细胞,800rpm离心5min,洗去未结合一抗,重复一次。
(5)加入荧光标记(FITC)标记的二抗,冰上避光放置40min后,800rpm离心5min,去上清,PBS洗涤两次。
(6)加入0.5ml 1%多聚甲醛重悬细胞;固定待测。
(7)流式细胞仪检测荧光值,每管计数10 000个细胞。
细胞周期、细胞凋亡及DNA倍体分析样品(PI染色)的制备:
(1)待测样本制成单细胞悬液,然后200g离心5分钟,弃上清。
(2)用4℃预冷的70%冷乙醇固定,4℃保存 ,至少固定18小时。
(3)调整细胞浓度为106细胞/毫升,取1毫升细胞悬液,用PBS洗三次,细胞重悬于1毫升PI染液中,37℃孵育30分钟即可进行流式分析。
(4)PI染液终浓度为50微克/毫升,RNase A终浓度为20微克/毫升。

其他*产品:
1-BroMoethyl acetate 1-溴乙基乙酸酯 40258-78-4
11-cis-retinal  564-87-4
11-CYANOUNDECYLTRICHLOROSILANE  724460-16-6
11-KETOANDROSTERONE  1231-82-9
11-KETODEHYDROEPIANDROSTERONE  17520-02-4
11-MERCAPTOUNDECYLPHOSPHORIC ACID, 99 11-巯基十一烷基磷酸 188678-49-1
11-MERCAPTOUNDECYLTRIMETHOXYSILANE  877593-17-4
11-OCTADECYN-1-OL  84999-79-1
1200 kg 诺孕美特 25092-41-5
1248-18-7 C. I. 颜料红 49 1248-18-6
125g 正碳十九酸 646-30-0
13(R)-hydroxy-9,11-octadienoic acid  10219-69-9
13-AMino-5,8,11-trioxa-2-azatridecanoic acid 1,1-diMethylethyl ester 13-氨基-5,8,11-三氧杂-2-氮杂十三烷酸 1,1-二甲基乙酯 101187-40-0
13C Carbon disulfode  30860-31-2
Min  17735-94-3
MDPV 1-(3,4-亚甲基二氧苯基)-2-吡咯烷-1-基戊酮盐酸盐 24622-62-6
13-Hydroxylabda-8(17),14-dien-18-oic acid 13-羟基赖百当-8(17),14-二烯-18-酸 83915-59-7
13-TETRADECYN-1-OL  18202-12-5
14,15-DidehydrovincaMenine 14,15-DIDEHYDROVINCAMENINE 112219-48-4
14-BroMo-1-tetradecanol 14-溴-1-十四烷醇 72995-94-9
15 x 1 g 氨基甲酰磷酸 二钠盐 72461-86-0
细胞冻存
1.将细胞消化下来,移入离心管离心,弃上清
2.准备冻存液比例:50%FBS+40%培养基+10%DMSO(现用现配)
3.加1.5冻存液在离心管中,将细胞吹打均匀,移入冻存管内.
放入-20度冰箱2-4小时后.再放入-80度冰箱过夜,第二天放入液氮罐保存
原则  慢冻速溶
4.加1.5冻存液在离心管中,将细胞吹打均匀,移入冻存管内。
冻存时间。放入4度冰箱10分钟。再放入-20度冰箱30分钟-1小时。不能超过1小时。zui后放入-80度冰箱过夜。第二天放入液氮中。

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