LA-GC DNA polymerase说明书

货号                                                           规格

PE009-05                                            50ulx 1 （250 U）

PE009-10                                           100ul  x 1 （500 U）

保存：-20℃

运输：2-8℃

【产品概述】

本产品由BioChange LA-GC DNA Polymerase和优化的扩增高GC含量片段的缓冲液组成，用于一般PCR方法无法实现的高GC含量DNA片段的扩增。LG-GC DNA Polymerase所具有的3’5’端DNA外切酶活性弥补了Taq DNA Polymerase保真性不足的缺点，适用于较长片段或保真性要求较高的扩增；优化的高GC PCR缓冲液系统可提高引物结合的特异性和LG-GC DNA Polymerase的热稳定性，从而有助于DNA Polymerase延伸通过二级结构区。二者的有机结合，既可以扩增高GC含量的双链DNA片段，又可以扩增高GC含量的单链DNA，具有广泛的PCR条件适应能力，无须多步优化PCR条件，是PCR实验中高产量和高特异性的*选择。使用LA-GC DNA Polymerase扩增的一部分PCR产物3’-末端附有突出的A碱基，可直接进行TA克隆。但建议将PCR产物纯化，进行加A处理后，再与T载体连接，以保证克隆效率。

【产品组分】

LA-GC DNA Polymerase （5 U/ul） 50ul

10 x LA-GC PCR Buffer （Mg2+-plus） 1 ml

【保存条件】

-20℃恒温保存一年

【活性定义】

用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，在74℃、30分钟内，摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物所需的酶量定义为1个活性单位（U）。

【使用方法】

用户需自备的试剂：DNA模板、引物、dNTP Mix、ddH2O

操作示例：

1．PCR反应体系的建立：冰上配制下列反应 2. PCR反应循环的设置：

DNA模板 1 μl 94℃ 2 min

10 x LA-GC PCR buffer 5μl 94℃ 30 sec

25 mM MgCl2 不加或适量 55~65℃ 30 sec 25~35循环

10 mM dNTP Mix 1 μl 72℃ 30 sec/1 kb

正向引物 （10 μM） 1 μl 72℃ 5 min

反向引物 （10 μM） 1 μl

LG-GC DNA polymerase （5 U/μl ） 0.5~1 μl

ddH2O 补足至50 μl

 模板量：10~1000 ng基因组DNA，1~30 ng质粒，或1~2 μl RT-PCR反应后的cDNA

注意：以上举例为常规PCR反应系统，仅供参考。实际反应条件因模板、引物等的结构不同而各异，需根据模板、引物、目的片段的特点设定*反应条件，并根据比例放大或缩小反应体系。

3. 结果检测：取2 μl反应液电泳观察结果。

【备注】

本产品仅供科研使用。在确认产品质量出现问题时，本公司承诺为客户免费更换等量的质量合格产品。在所有情况下，本公司对此产品所承担的责任，*于此产品的价值本身。