产品名称：大骨源性碱性磷酸酶elisa试剂盒

产品规格：48孔/96孔

保存条件：2-8℃

主要用途：科研检测

大骨源性碱性磷酸酶elisa试剂盒操作步骤：

1.加样：分别设空白孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔加待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。 

2.弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加辣根过氧化物酶标记抗小鼠IgG工作液100μl（取1μl*标记抗体加99μl*标记抗体稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制），37℃，60分钟。 

3.温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。

4.依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见孔内有明显蓝色，即可终止）。 

5.依序每孔加终止溶液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。 

6.用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。在加终止液后15分钟以内进行检测。

“”实验在做到严格要求的同时有着一些不能忽视的小细节：

1.用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。

2.液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。

3.洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可*保存。

4.吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。

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