小鼠8异前列腺素(8-iso-PG)ELISA试剂盒
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面议小鼠8异前列腺素(8-iso-PG)ELISA试剂盒特性
◎选择正规厂家,产品经相应政府部门审核认可,试剂应从灵敏度、特异性、精密度、稳定性、简便性、安全性及经济性全面评价。
◎灵敏度:有二层含义,1)为试剂检出被检物质的zui低量的能力;2)为试剂对大量样品中阳性检出的能力。
◎特异性:常用交叉反应率表示。含有与待测物相近结构部份的物质可能存在交叉反应,使测定结果升高,可能导致假阳性,所以交叉反应是评价其质量的关键指标。
◎精密度:ELISA试剂一般指其批内CV%,其值应小于15%;定量试剂应同时考察线性范围。
◎准确度:通过添加回收实验进行评价。
◎简便性:指在不影响试剂的前三项指标的前题下,实验和测定步骤越少越好,在定性实验中结果判断简单明了,定量试验结果计算也应简单。
◎安全性:指试剂对操作者和环境安全无害无传染性。
◎经济性:试剂在同等质量条件下通过大规模生产或技术进步降低成本,而市场价格比较合理。
◎试剂评价:需要有的确证方法和确证的样品进行检测。
操作程序总结
准备试剂,样品和标准品
加入准备好的样品和标准品,37℃反应30分钟
洗板5次,加入酶标试剂,37℃反应30分钟
洗板5次,加入显色液A、B,37℃显色10分钟
加入终止夜
15分钟内读OD值
小鼠8异前列腺素(8-iso-PG)ELISA试剂盒性能
1. 灵敏度:zui小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性:不与其它细胞因子反应。
3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。
结 果 判 断 与 分 析
1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值
2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的AC-1标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的AC-1含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。
小鼠8异前列腺素(8-iso-PG)ELISA试剂盒注意事项
1. 当混合蛋白溶液时应尽量轻缓,避免起泡。
2. 洗涤过程非常重要,不充分的洗涤易造成假阳性。
3. 一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,*使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。
5. 如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请zui后乘以稀释倍数。
6. 在配制标准品、检测溶液工作液时,请以相应的稀释液配制,不能混淆。
7. 底物请避光保存。
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