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人8异前列腺素F2α(8-iso-PGF2a)

时间:2015-06-03      阅读:148

人8异前列腺素F2α(8-iso-PGF2a)操作步骤 
1.   标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。 
2000pg/ml  5 号标准品  150μl 的原倍标准品加入 150μl 标准品稀释液 
1000pg/ml  4 号标准品  150μl 的5 号标准品加入 150μl 标准品稀释液 
500pg/ml  3 号标准品  150μl 的4 号标准品加入 150μl 标准品稀释液 
250pg/ml  2 号标准品  150μl 的3 号标准品加入 150μl 标准品稀释液 
125pg/ml  1 号标准品  150μl 的2 号标准品加入 150μl 标准品稀释液 
 
 
2.   加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、
待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50μl,待测样品孔中先加样品稀释液 40μl,
然后再加待测样品 10 μl(样品zui终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽
量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。 
3.   温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。       
4.   配液:将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用 
5.   洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此
重复5 次,拍干。 
6.   加酶:每孔加入酶标试剂 50μl,空白孔除外。   
7.   温育:操作同 3。 
8.   洗涤:操作同 5。 
9.   显色:每孔先加入显色剂 A50μl,再加入显色剂 B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
15分钟. 
10.  终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。 
11.  测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。  测定应在加终止
液后15 分钟以内进行。

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人8异前列腺素F2α(8-iso-PGF2a)保存条件及有效期 
1.试剂盒保存:;2-8℃。 
2.有效期:6 个月

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