Millipore ZipTip微量层析柱你了解多少？
时间：2020-12-28 阅读：6563
Millipore ZipTip微量层析柱---为MALDI-ToF MS浓缩和纯化样品
概述
ZipTip的优点
- 一步脱盐、浓缩和纯化
- 分级分离复杂样品，以获得更有意义的数据
- 适合肽、核酸和其他样品的理想工具
- 无滞留体积，z大化回收
- 省却了耗时的色谱分析
ZipTip是一种10 µL微量层析柱，配有0.6或0.2 µL色谱培养基柱床，固定于其末端，无滞留体积。是为了敏感的下游分析进行样品浓缩和纯化的理想工具。
下面是可以用ZipTip样品制备加以改善的一些分析举例：
- 质谱
- HPLC（高性能液相光谱）
- 毛细管电泳
- 原子吸收光谱
ZipTip微量层析柱简单易用。
- 将微量层析柱装到单通道或多通道移液器、标准22口径钝端HPLC针、或兼容的自动移液/样品制备站上。
- 吸取和分配培养基数次以进行样品结合。
- 用类似方法，吸取和分配适当的清洗溶液，以去除污染物。
- 将浓缩、纯化后的样品洗提到1–4 µL相容溶剂中，然后直接移液到质谱分析、小杯或其他分析步骤。
对于要求更小的洗提体积的应用（例如<1 µL），我们还提供含有0.2 µL培养基的微量柱床。
ZipTip微量层析柱为浓缩和纯化飞克摩尔至皮摩尔的肽、蛋白和寡核苷酸提供了再现性和回收率z越的方法，使分析数据更好。要想进一步简化分析，您还可以通过分步洗提来分级分离复杂的肽混合物。
性能
有3种不同的ZipTip树脂可供选择：
| 树脂 | 相容分析物 |
| C18树脂（0.6 µL或0.2 µL柱床容积） | 寡核苷酸或小蛋白（<50 kDa）/肽水溶液 |
| C4树脂 | 蛋白或肽（3 kDa – 100 kDa）水溶液 |
| 强阳离子交换树脂（SCX） | 含有有机溶剂或除垢剂的肽溶液 |
ZipTip®微量层析柱是一种10 µL层析柱，配有0.6或0.2 µL色谱培养基柱床，固定于其末端。其特别适合为敏感的分析（例如MALDI-ToF MS）浓缩和纯化样品。ZipTip®微量层析柱为浓缩和纯化飞克摩尔至皮摩尔的肽、蛋白和寡核苷酸提供了再现性和回收率z越的方法，使分析数据更好。要想进一步简化分析，您还可以通过分步洗提来分级分离复杂的肽混合物。
规格
| 材料 | ||
| 微量层析柱 | 聚丙烯 | |
| C18 和µ-C18 树脂 | 硅珠，15 µm，200 Å孔径 | |
| C4树脂 | 硅珠，15 µm，300 Å孔径 | |
| SCX树脂 | 强阳离子交换树脂，12 µm，300 Å孔径 | |
| 体积，µL | ||
| 微量层析柱 | 10 µL | |
| 树脂柱床 | 0.2或0.6 | |
| 容量 | ||
| ZipTipC18 | 当分析物达到饱和时，通常为5 µg | |
| ZipTipµ-C18 | 当分析物达到饱和时，通常为2.0 µg | |
| ZipTipC4 | 当分析物达到饱和时，通常为3.3 µg | |
| 尺寸 | ||
| Tip 长度 | 31 mm | |
| Tip 内径 (顶) | 3.375 mm | |
| Tip 外径 (顶) | 5.8 mm | |
| 温度 | 4至70 °C | |
| pH 范围 | pH1.5 – pH13.5；当24小时接触时，为pH2 – pH12 | |
推荐的配套设备
手动移液：
ZipTip微量层析柱适配大多数10 µL单通道移液器。如要同时处理8个样品，建议使用Biohit Proline® 多通道电子移液器。
自动移液：
ZipTip微量层析柱还可配用多种自动移液系统，包括：
- 用于Biospectrometry™ 的ABI SymBiot® 样品工作站（ABI货号：GEN602987），配有适合ZipTip微量层析柱通用锥尖和适合ZipTip盒子的支架适配器
- 基因组溶液ProMS™ 样品制备站
- Bruker Daltonics MAP™ II 和 II/8 MALDI AutoPrep系统，配有适合ZipTip盒子的支架适配器（密理博货号：ST0B DAP TR）
- Tecan GENESIS工作站
- CyBio CyBi™-96孔自动移液器
脱盐步骤
(1)用50%ACN中性溶液活化Millipore C18 ZipTip. 吸排5~10次。
(2)用0.1% 甲酸溶液平衡C18 ZipTip。 吸排除5~ 10次。」
(3)用2 ul 0.1%甲酸溶解酶切产物，用C18 ZipTip 吸附肽段。吸排5~10次。
(4)用0.1%甲酸溶液洗盐。吸排2~3次。
(5)吸取4ul含0.1% 甲酸的50%ACN溶液洗脱肽段供质谱分析。在空样品管①中吸排5~10次。
(6)吸取4ul含0.1%甲酸的70%ACN溶液洗脱肽段供质谱分析。在空样品管②中吸排5~10次。
(7)用70%ACN中性溶液吸排5~10次，洗净ZipTip柱。
特别注意事项:样品中不应该含有机溶剂