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人胃癌细胞MKN-45
种属 | 人 |
别称 | MKN-45; MKN 45 |
组织来源 | 胃 |
疾病 | 胃腺癌 |
传代比例/细胞消化 | 1:2-1:3传代,消化2-3分钟 |
培养基配置 | RPMI1640培养基;10%胎牛血清;1%双抗 |
简介 | 该细胞系由 Hojo H建立,源于日本一位62岁低分化胃腺癌女性患者的肝转移灶。 |
形态 | 上皮细胞样 |
生长特征 | 圆形,贴壁和少量悬浮生长 |
倍增时间 | ~60h |
STR | Amelogenin:X;CSF1PO:12;D13S317:8,11;D16S539:10;D18S51:16;D19S433:14,16.2;D21S11:31;D2S1338:OL;D3S1358:15,16;D5S818:10,11;D7S820:10,11;D8S1179:13,17;FGA:19,24;TH01:7;TPOX:8;vWA:19; |
培养条件 | 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。 |
冻存条件 | 冻存液:90%FBS,DMSO 10%, 或使用非程序冻存液:货号BT-H040 |
保藏机构 | DSMZ; ACC-409 |
备注 | 悬浮部分离心收集(1000RPM,5分钟),贴壁细胞部分消化2-3分钟处理。 |
产品使用 | 仅限于科学研究,不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。 |
人胃癌细胞MKN-45
细胞接收处理流程:
1:观察有无破损漏液情况,如有请拍照及时联系客服。
2:酒精消毒培养瓶表面后显微镜下观察细胞状态,观察拍照后不用打开培养瓶盖放入培养箱静止2-3小时稳定 细胞状态。
3:请按照细胞操作指南进行次传代冻存处理。
4:产品随货会附带细胞说明书、细胞培养操作指南、细胞鉴定、支原体检测报告。5:若产品有异常或其他疑问,可随时联系客服;转至技术支持
常温细胞收货当天处理方式1. 收到常温细胞后,及时拍照记录有无漏液/瓶身破损现象。
2. 镜下观察有无微生物污染现象,拍照记录不同倍数镜下细胞状态和有无染菌现象,方便后续售后处理。
3.消毒后,更换赠送的wan全培养液放置培养箱静止2-3小时。如细胞有多数悬浮细胞需要离心收集重新接种止培养瓶。
4. 观察细胞密度若超过 80%则可正常传代处理(有的原代细胞不可传代,请根据实际情况决定),shou次传代推荐比例 1:2 到 1:3(按实际收货细胞密度决定,若不确定可联系技术支持);若细胞密度不到 80%则可继续培养,注意拧松瓶盖或更换透气瓶盖;悬浮细胞注意离心所有培养基以收集细胞。
5. 由于气温,运输等影响造成贴壁细胞漂浮的,请将细胞离心收集后在离心管中消化后进行传代(参考附件),或及时联系技术支持进行指导传代。
半贴壁半悬浮细胞处理:
6.该细胞是半贴壁半悬浮生长,悬浮细胞可用离心管收集细胞悬液后,1000rpm 离心5min,离心收集上清
7.当细胞密度在80%以下,将收集T25瓶中的悬浮细胞离心后用入5ml wan全培养基重悬,加入回到原培养瓶中继续培养,若细胞生长80%以上对细胞进行传代,传代时需要将悬浮细胞和贴壁细胞的沉淀用 1-2ml wan全培养基重悬收集到一起,混匀后按1:2比例接种到新的培养瓶。半贴壁半悬浮细胞传代:
8.贴壁细胞可用PBS润洗后,在培养瓶中加入1~2毫升0.25 % yi蛋白酶溶液(含EDTA)置于37℃培养箱中消化,待细胞变圆收缩后可用5mL左右wan全培养基进行终止消化,然后轻轻吹散细胞后离心搜集细胞;
9.将收集到的悬浮细胞、pbs清洗液中的细胞和消化下来的贴壁细胞以1000rpml离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加5-8ml按照说明书要求配置的新的wan全培养基以保持细胞的生长活力,放入培养箱培养。