FOR RESEARCH USE ONLY

Drug Names

Generic Name：犬狂犬病毒抗原RV-AgELISA试剂盒

      This kit can be used for determination of serum, plasma and liquid samples Organization Content.

犬狂犬病毒抗原RV-AgELISA试剂盒The experimental principle:

The product levels were measured in samples of the kit by double antibody sandwichmethod. The product with the purified antibody coated microtiter plate, made of solid phase antibody, to package is the product antigen monoclonal antibodies are then added to the micropores, the product and then with HRP labeled antibody binding, the formation of antibody - antigen - antibody complex enzyme label, after thorough washing with TMB chromogenic substrate. TMB in the HRP enzyme catalytic conversion into the blue, and in the action of acid into the final yellow. This product is positively related to the depth of color and in the samples. Instrument measured absorbance in the 450nm wavelength with ELISA (OD), the product concentration in the samples was calculated by standard curve.

Materials provided with the kit

Specimen requirements

• serum- coagulation at room temperature 10-20 mins，centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant, If precipitation appeared, Centrifugal again.
• plasma-use suited EDTA or citrate plasma as an anticoagulant,mix 10-20 mins ,centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant, If precipitation appeared, Centrifugal again.
• Urine-collect sue a sterile container, centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant, If precipitation appeared, Centrifugal again. The Operation of Hydrothorax and cerebrospinal fluid Reference to it.
• cell culture supernatant-detect secretory components, collect sue a sterile container, centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant,detect the composition of cells, Dilut cell suspension with PBS（PH7.2-7.4）, Cell concentration reached 1 million / ml, repeated freeze-thaw cycles, damage cells and release of intracellular components, centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant, If precipitation appeared, Centrifugal again.
• Tissue samples- After cutting samples, check the weight,add PBS（PH7.2-7.4）, Rapidly frozen with liquid nitrogen, maintain samples at 2-8℃ after melting,add PBS（PH7.4）, Homogenized by hand or Grinders, centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant.
• extract as soon as possible after Specimen collection,and according to the relevant literature, and should be experiment as soon as possible after the extraction. If it can’t, specimen can be kept in -20 ℃ to preserve, Avoid repeated freeze-thaw cycles.
• Can’t detect the sample which contain NaN3, because NaN3 inhibits HRP active.

Assay procedure

1.Dilute and add sample to Standard: set 10 Standard wells on the ELISA plates coated, add Standard 100μl to the first and the second well, then add Standard dilution 50μl to the first and the second well, mix; take out 100μl form the first and the second well then add it to the third and the forth well separay. then add Standard dilution 50μl to the third and the forth well ,mix ; then take out 50μl from the third and the forth well discard, add 50μl to the fifth and the sixth well ,then add Standard dilution 50μl to the fifth and the sixth well, mix ; take out 50μl from the fifth and the sixth well and add to the seventh and the eighth well, then add Standard dilution 50μl to the seventh and the eighth well ,mix ; take out 50μl from the seventh and the eighth well and add to the ninth and the tenth well, add Standard dilution 50μl to the ninth and the tenth well, mix , take out 50μl from the ninth and the tenth well discard(add Sample 50μl to each well after Diluting ,(density: 240ng/L,160ng/L ,80ng/L,40ng/L, 20ng/L)

2.add sample：Set blank wells separay (blank comparison wells don’t add sample and HRP-Conjugate reagent, other each step operation is same). testing sample well. add Sample dilution 40μl to testing sample well, then add testing sample 10μl (sample final dilution is 5-fold), add sample to wells , don’t touch the well wall as far as possible, and Gently mix.

3.Incubate: After closing plate with Closure plate membrane ,incubate for 30 min at 37℃.

4.Configurate liquid: 30-fold (or 20-fold)wash solution diluted 30-fold (or 20-fold) with distilled water and reserve.

5.washing：Uncover Closure plate membrane, discard Liquid, dry by swing, add washing buffer to every well, still for 30s then drain, repeat 5 times, dry by pat.

6.add enzyme：Add HRP-Conjugate reagent 50μl to each well, except  blank well. 

7.incubate：Operation with 3.

8.washing：Operation with 5.

9.color：Add Chromogen Solution A 50ul and Chromogen Solution B to each well, evade the light preservation for 15 min at 37℃

10.Stop the reaction：Add Stop Solution50μl to each well, Stop the reaction(the blue color change to yellow color).

11.assay：take blank well as zero , Read absorbance at 450nm after Adding Stop Solution and within 15min.

Important notes

• The kit takes out from the refrigeration environment should be balanced 15-30 minutes in the room temperature, ELISA plates coated if has not use up after opened, the plate should be stored in Sealed bag.
• washing buffer will Crystallization separation, it can be heated the water helps dissolve when dilute . Washing does not affect the result.
• add Sample with sampler Each step, And proofread its accuracy frequently, avoids the experimental error. add sample within 5 mins, if the number of sample is much , recommend to use Volley .
• if the testing material content is excessively higher (The sample OD is bigger than the first standard well ),please dilute Sample (n-fold), Please diluente and multiplied by the dilution factor.（×n×5）.
• Closure plate membrane only limits the disposable use, to avoid cross-contamination.
• The substrate evade the light preservation.
• Please according to use instruction strictly, The test result determination must take the microtiter plate reader as a standard.
• All samples, washing buffer and each kind of reject should according to infective material process.
• Do not mix reagents with those from other lots.

Calculate：

Take the standard density as the horizontal, the OD value for the vertical ,draw the standard curve on graph paper, Find out the corresponding density according to the sample OD value by the Sample curve, multiplied by the dilution multiple, or calculate the straight line regression equation of the standard curve with the standard density and the OD value ,with the sample OD value in the equation, calculate the sample density, multiplied by the dilution factor, the result is the sample actual density.

Storage and validity

1．Storage：  2-8℃.

2．validity： six months.

其它产品qy-1918R    Anti-Tubulin-γ  微管蛋白-γ抗体    0.1ml/0.2ml
qy-1919R    Anti-TY3H/TH (Tyrosine Hydroxylase )  酪氨酸羟化酶抗体    0.1ml/0.2ml
qy-1920R    Anti-Tyrosinase  酪氨酸酶抗体    0.1ml/0.2ml
qy-1921R    Anti-Tβ10 (thymosin β10)  胸腺素β10抗体    0.1ml/0.2ml
qy-1922R    Anti-UAT (Urate transporter/channel)  尿酸盐转运子抗体    0.1ml/0.2ml
qy-1923R    Anti-VAP1 (vascular adhesion protein 1)  血管粘附蛋白1抗体    0.1ml/0.2ml
qy-1924R    Anti-VCAM-1/CD106 (Vascuolar cell adhesion molecule 1)  血管内皮细胞粘附分子抗体    0.1ml/0.2ml
qy-1925R    Anti-VEGF(Vascuoar endothelial growth factor)  血管内皮生长因子抗体    0.1ml/0.2ml
qy-1926R    Anti-VEGF（Rabbit）  血管内皮生长因子抗体    0.1ml/0.2ml
qy-1927R    Anti-VEGFR1/VEGF-R1/Flt-1 （Vascular Epidemal growth factor receptor-1）  血管内皮生长因子受体1抗体    0.1ml/0.2ml
qy-1928R    Anti-VEGFR2/VEGF-R2/Flk1 （Vascular Epidemal growth factor receptor-2）  血管内皮生长因子受体2抗体    0.1ml/0.2ml
qy-1929R    Anti-VEGFR-3（Vascular Epidemal growth factor receptor-3）  血管内皮细胞生长因子受体-3    0.1ml/0.2ml
qy-1930R    Anti-Vimentin  波形蛋白抗体    0.1ml/0.2ml
qy-1931R    Anti-VIP (Vasoactive Intestinal peptide)  血管活性肠肽抗体    0.1ml/0.2ml
qy-1932R    Anti-Visfatin-1/PBEF1(NT)  内脂素/内脏脂肪素/腹脂素/内肥素（小鼠抗人、大、小鼠、猴：N端多肽）    0.1ml/0.2ml
qy-1933R    Anti-Visfatin-1/PBEF1(NT) hu、 mo、 rat、MK  内脂素/内脏脂肪素(N端抗体)    0.1ml/0.2ml
qy-1934R    Anti-Visfatin-1/PBEF1(NT) Human  内脂素/内脏脂肪素（N端抗体）    0.1ml/0.2ml
qy-1935R    Anti-Visfatin-2(CT)hu、mo、rat、 MK  内脂素/内脏脂肪素（C端抗体）    0.1ml/0.2ml
qy-1936R    Anti-VSIG4 (V-set and immunoglobulin domain-containing protein 4)Antibody  T淋巴细胞负调节蛋白之一抗体    0.1ml/0.2ml
qy-1937R    Anti-VTG(vilogenin)  卵黄蛋白原抗体    0.1ml/0.2ml
qy-1938R    Anti-VWF (Von Willebrand Factor)  血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗体    0.1ml/0.2ml
qy-1939R    Anti-WNK4(Ser/Thr-protein kinase WNK4; protein kinase with no lysine 4; protein kinase, lysine –dficient 4)  一种新的/激酶家族成员的基因WNK4抗体    0.1ml/0.2ml
qy-1940R    Anti-WWOX （WW domain-containing oxidoreductase）  包含氧化还原酶的WW域抗体    0.1ml/0.2ml
qy-1941R    Mouse Anti-YERSINIA PESTIS Monoclonal Antibody  鼠抗鼠疫F1蛋白/鼠疫耶尔森氏菌荚膜抗原F1单克隆抗体    0.1ml/0.2ml
qy-1942R    anti-XIAP（X-linked Inhibitor of Apoptosis Protein）  X-连锁凋亡蛋白/性连锁凋亡抑制蛋白抗体    0.1ml/0.2ml
qy-1943R    anti-XAF1（XIAP-associated factor 1）  XIAP相关因子1抗体    0.1ml/0.2ml
qy-1944R    Anti-XRCC1（X-ray Repair Cross Complementing 1）  X射线修复交叉互补蛋白/细胞碱基切除修复基因抗体    0.1ml/0.2ml
qy-1945R    Anti-ZCWCC1(Zinc finger CW-type coiled-coil domain protein 1)  ZCWCC1抗体    0.1ml/0.2ml
qy-1946R    Anti-Z-DEVD-FMK(CASPASE3/CPP32 INHIBITOR W-3)  CASPASE3凋亡抑制剂    0.1ml/0.2ml
qy-1947R    Anti-ZNF268 (zinc finger protein ZNF268)- middle (1b)  锌指脂蛋白-1b抗体    0.1ml/0.2ml
qy-1948R    Anti-ZNF268 (zinc finger protein ZNF268)- middle (1c)  锌指脂蛋白-1c抗体    0.1ml/0.2ml
qy-1949R    Anti-ZNF268 (zinc finger protein ZNF268)- N-terminal (1a) Anti-ZNF268 (zinc finger protein ZNF268)- N-terminal (1a)  锌指脂蛋白-1a抗体    0.1ml/0.2ml
qy-1950R    Anti-ZNF300 (zinc finger protein ZNF300)- middle  锌指蛋白300抗体    0.1ml/0.2ml
qy-1951R    anti-ZO-1（zonula occludens-1）  胞质紧密粘连蛋白1抗体    0.1ml/0.2ml
qy-1952R    Anti-β-Actin/HRP  辣根过氧化物酶标记β-肌动蛋白（抗体）    0.1ml/0.2ml
qy-1953R    Anti-人T亚群/NK细胞检测试剂盒  人T淋巴细胞亚群检测盒         （T-SuRCet）    0.1ml/0.2ml
qy-1954R    CD2AP (CD2-associated protein)  白细胞分化抗原CD2AP    0.1ml/0.2ml