3-羟酰*脱氢酶(3HCD)酶联免疫分析试剂盒操作详解
时间:2015-04-29 阅读:196
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江苏科特商贸有限公司 -
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0.4ng/L -20ng/L
使用目的:
本试剂盒用于测定微生物样本中3-羟酰辅酶A脱氢酶(3HCD)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中3-羟酰辅酶A脱氢酶(3HCD)水平。用纯化的3-羟酰辅酶A脱氢酶(3HCD)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入3-羟酰辅酶A脱氢酶(3HCD),再与HRP标记的3-羟酰辅酶A脱氢酶(3HCD)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的3-羟酰辅酶A脱氢酶(3HCD)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中3-羟酰辅酶A脱氢酶(3HCD)浓度。
计算
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,*使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔*孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请zui后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。