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大肠杆菌/大肠菌群显色培养基成份 (g/L)
特殊营养物质 | 28.19 |
混合显色剂 | 0.31 |
琼脂 | 13.0 |
pH 6.8 ± 0.2 25 ℃ |
此配方可以进行改良或增加营养成份以获得*的结果。
大肠杆菌/大肠菌群显色培养基注意
此培养基仅供实验室使用。
用法
称取本品 41.5g 加入 1000ml 蒸馏水,加热溶解并不停搅拌,煮沸不要超过 1 分钟。取 1ml 制备好的样品液加入直径为 9cm 无菌平皿中心,倾入冷却至 45-50 ℃培养基约 15ml ,混匀,凝固后,再加入一层培养基进行履盖。或冷却至 45-50 ℃时,倾入无菌平皿,琼脂*凝固后,在 37 ℃的培养箱中倒置放置 1-2 小时,加入适当稀释度的样品液 1ml ,涂布于培养基上, 36 ± 1 ℃培养 18 ~ 24h 。
贮存
制备好的平板应立即使用,应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处, 保存温度 2-8 ℃,注意避光保存。
失效
干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。
操作步骤
1 、按国家标准、 SN 标准、 FDA 标准或其它方法制备样品液
2 、取样品液 1ml 加入 冷却至 45-50 ℃显色培养基中混匀或 涂布于平板上
3 、 36 ± 1 ℃培养 18 ~ 24h ,选用有 30 ~ 200 个菌落的平板,计数平板上出现的典型大肠菌群和大肠杆菌菌落。大肠杆菌典型菌落为蓝色至紫色,大肠菌群为粉红色菌落,其它细菌为无色或黄色菌落。
总大肠菌群 = 蓝色菌落 + 紫色菌落 + 粉红色菌落
大肠杆菌 = 蓝色菌落 + 紫色菌落
4 、对可疑大肠杆菌菌落可划线接种到营养琼脂平板上, 36 ± 1 ℃培养 12-16 小时,挑取单菌落做大肠杆菌全套生化试验 ( 本公司有生化鉴定管套装 20 支 x3 种 )
质量控制
1 、外观
此干燥培养基的粉末均匀,具有良好的流动性,呈淡红色。制备好的平板呈透明粉红色固体培养基。
2 、微生物试验
在 36 ± 1 ℃培养 18 ~ 24h 小时:
质控菌株 | ATCC | 生长情况 | 菌落颜色 |
单增李氏菌 | 27853 | -/+ | 无色 |
* | 25923 | -/+ | 无色 |
大肠杆菌 | 25922 | +++ | 蓝色 |
沙门氏菌 | +++ | 无色 | |
大肠菌群 | +++ | 粉红色 |
方法的局限性
本培养基鉴定 大肠菌群 / 大肠杆菌,少数情况下可能会出现假阳性,但不会出现假阴性,有时可能需做其它补充试验。
典型特征
大肠杆菌典型菌落为蓝色至紫色,大肠菌群为粉红色菌落,其它细菌为无色菌落。