TC、TG实验方法
时间：2015-07-17 阅读：272
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一、组织样本
1、同样还是用等渗缓冲液，按重量体积1：9，制备匀浆，2500rpm*10min，取上清即10%匀浆用于TG、TC的测定（提取的不*，但也能测定）
2、用有机溶剂提取，a:用无水乙醇作匀浆介质，按上面方法制备匀浆待测，提取效果比等渗缓冲液好
b:用特殊有机溶剂提取（如氯仿甲醇混合液等）提取效果好，但由于高挥发，测定不准确，所以一般需用N2吹干后用无水乙醇复溶后进行测定。
二、培养细胞
1、用PBS洗细胞
2、加入500ul乙醇，使之铺满培养皿，培养皿内的细胞泛白时把培养皿斜放，用细胞刮板将细胞刮下来，使细胞浸泡在乙醇中
3、用移液器把细胞和乙醇移到玻璃匀浆器中，碾磨3分钟成悬液
4、收集悬液，4000 rpm*10min离心，取上清50ul测定
三、奶样
新鲜或者冻存的奶样本，用无水乙醇按照不同比例进行提取（奶样：无水乙醇=1：1、1：4、1：9、1：19、1：49、1：99）充分漩涡混匀2分钟，4000转/分离心10分钟，取上清按操作表操作。
按稀释度、结果做浓度曲线，取直线线性段的浓度为宜。
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