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弧菌显色培养基,用于食品、海产品、病人粪便样品和水产品中副溶血性弧菌的快速检测。副溶血性弧菌显绿色且菌落比较大,霍乱弧菌显红色,其它弧菌显红色、蓝色或无色且菌落比较小;其它细菌绝大部分被抑制。本培养基的特异性高,可以克服TCBS培养基引起的假阴性结果,是一种很理想的快速检测培养基
弧菌显色培养基成份 (g/L)
特殊营养物质 | 75.0 |
混合显色剂 | 4.45 |
琼脂 | 15.0 |
pH 8.6 ± 0.1 25 ℃ |
此配方可以进行改良或增加营养成份以获得*的结果。
注意
此培养基仅供实验室使用。
用法
称取本品 18.9g 加入200ml蒸馏水,加热煮沸溶解并不停搅拌,加热2-5分钟。冷却至45-50℃时,倾入无菌平皿。
注意:制备好的培养基一定要保持表面干燥,可在 37 ℃的培养箱中倒置放置 1-2 小时。
贮存
制备好的平板可保存 2-5 天,应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处, 保存温度 2-8 ℃,注意避光保存。
失效
干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。
操作步骤
1、按国家标准、 SN 标准、 FDA 标准或其它方法制备样品液;
2、取 1ml 样品液加入 9mlSCPB 肉汤或碱性蛋白胨水中, 37 ℃ 增菌培养 18-24 小时;
3、用 3mm 接种环取 1 环增菌液,划线接种到副溶血性上,做 2 个平板;
4、36±1℃培养18-24h,副溶血性弧菌显绿色,菌落比较大;霍乱弧菌显红色,其它弧菌显红色、蓝色或无色且菌落比较小, 其它细菌绝大部被抑制;
5、对可疑菌落可划线接种到营养琼脂平板上, 36 ± 1 ℃培养 12-16 小时,挑取单菌落做副溶血性弧菌全套生化试验。
质量控制
1 、外观
此干燥培养基的粉末均匀,具有良好的流动性,呈淡黄色。制备好的平板呈淡粉色至黄色固体培养基。
2 、微生物试验
在 36 ± 1 ℃培养 18-24h 小时:
质控菌株 | ATCC | 生长情况 | 菌落颜色 |
副溶血性弧菌 | 17802 | +++ | 绿色,菌落比较大 |
* | 25923 | - | - |
大肠杆菌 | 25922 | -/+ | 无色 |
溶藻弧菌 | 17749 | +++ | 红色且菌落比较小 |
* | +++ | 红色 |
方法的局限性
本培养基不能直接鉴定霍乱弧菌,副溶血性弧菌的特异性可达90%,准确性非常高,有时可能需做其它补充试验。
典型特征
典型副溶血性弧菌显绿色且菌落比较大,霍乱弧菌显红色,其它弧菌显红色、蓝色或无色且菌落比较小。