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高效液相色谱法测定*及其代谢产物*

时间:2020-04-21      阅读:606

  细胞色素P450I A2(CYPI A2)是主要存在于肝脏起氧化代谢作用的药物代谢酶,*是研究P450I A2活性的特异性底物。口服或静脉注射*后,经P450I A2酶催化,氮位去乙基,形成*。通过测定两者浓度,可以反应P450I A2在体内的活性。文献报道只测定*单一组分。本实验建立了高效液相色谱法同时测定*及其代谢物*的浓度,方法简便、快速、结果准确、可靠,适合药物的体内代谢研究。

仪器准备

 

仪器简介

    LC-600A智能全控液相色谱系统由P600高压恒流泵与UV600紫外检测器直接构成等度分析系统。使用WS600工作站可以同时控制数台P600高压恒流泵、UV600紫外检测器及恒温柱箱等,实行多元高压洗脱、波长扫描等功能。

 

应用领域

化合物检测、法医毒物分析、蛋白质组学食品检测、药物分析、环境分析、聚合物分析

 

样品处理:

精取血样0.2mL,加50μL内标,加入100μL2.5%硫酸锌溶液,振荡30s,16000r/min离心10/min,取上清液20μL进样测定。

 

谱条件:

 

色谱柱

Nova-Pak R C18(3.9mm×150mm,5μm)

流动相

甲醇水溶液

梯度洗脱程序

17%(体积分数,下同)甲醇(保持5min)→80%甲醇(10min)→17%甲醇(12min)

流速

1.0mL/min

检测波长

254nm

进样量

20ml

 

 

谱图分析

 

 

 

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