多酚氧化酶(PPO)（检测服务）

服务介绍：

多酚氧化酶(PPO)检测试剂盒(邻苯二酚比色法)检测原理是以邻苯二酚作为底物，在酶促反应的最适条件下采用每隔一定时间测定产物生成量的方法，于分光光度计420nm处检测吸光度，以吸光度变化所需酶量进行计算，主要用于植物组织的裂解液或匀浆液、血清等样品中内源性的多酚氧化酶活性，尤其适用于检测水果中多酚氧化酶活性。

背景介绍：

多酚氧化酶（PPO）是一种普遍存在于植物、真菌、昆虫的质体中的酶，甚至在土壤中腐烂的植物残渣上也可以检测到其活性。它又称儿茶酚氧化酶、酪-氨酸酶、苯-酚酶、甲酚酶、邻苯二酚氧化还原酶，是六大类酶中的大类氧化还原酶。PPO主要是一类含铜的氧化酶，能使一元酚和二元酚氧化产生醌，从而引起褐化。

操作步骤（仅供参考）：

1、 准备样品：

①植物样品：取3g植物组织或水果中层果肉加入6ml预冷的PPO Lysis Buffer研磨或匀浆，4℃ 10000g离心15~20min，留取上清液。

②血浆、血清和尿液样品：血浆、血清按照常规方法制备后可以用于该试剂盒的测定

③细胞或组织样品：取恰当的细胞或组织裂解液，如有必要用PPO Lysis Buffer进行适当匀浆，4℃ 10000g离心15~20min，取上清液，-20℃冻存，用于多酚氧化酶的检测。

④高活性样品：如果样品中含有较高活性的多酚氧化酶，可以使用PPO Lysis Buffer进行恰当的稀释。

2、 PPO加样：按照下表设置对照管、测定管，注意：对照管、测定管中样品为同一待测样品，但对照管中为提前加热煮沸5min的样品；溶液应按照顺序依次加入，

 3、 PPO检测：以对照管为对照(调零)，比色杯光径1.0cm，立即分光光度计测定420nm处测定管的吸光度(记为A测定0)；1min后立即测定420nm处测定管的吸光度(记为A测定1)。建议加入PPO Assay buffer后立即检测，加样时间越短越好，其反应基本在1~2min内，其后反应趋于平缓。

注意：该反应系统是利用速率变化，求得相应OD的变化，因此加入PPO Assay buffer立即计时很重要，每次检测指标不宜过多，否则有可能由于操作时间有差异进而导致结果偏差。

实验结果：

全自动生化仪检测后导出结果，结果由EXCEL形式发送。

送样须知：

1.南京和上海地区的客户可提供上门取样服务，提前一天联系

2.外地客户可邮寄样本，样本运输应符合一般的生物学要求，密封加冰袋或者干冰运输

3.若细胞、血清、组织样本具有潜在的传染性或致病性，请务必提前告知

4.测试结束提供实验报告后，样本可以保留1个月，若需保留样本或者回收样本请提前告知。

备注：本公司对客户的项目的专有技术和资料（包括实验方案，测试结果，样本等）负有保密的责任。

仅供科研实验用，不做其他用途！

多酚氧化酶(PPO)（检测服务）