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抗酸染色实验代测
抗酸染色简介:
抗酸染色法acid-fast staining method 1882年由埃利希(F.Ehrlich)*并经F.齐尔(Ziehl)改进而创造出的细菌染色法。
其中代表性的为对结核菌的齐尔-尼尔森(Ziehl-Neelsen)染色法和齐尔-加贝特(Ziehl-Gabbet)染色法。用石炭酸复红染色后,用盐酸乙醇分色,再用美蓝进行对比染色,即不再脱色而呈现石炭酸复红的红色。
抗酸染色原理:
分枝杆菌的细胞壁内含有大量的脂质,包围在肽聚糖的外面,所以分枝杆菌一般不易着色,要经过加热和延长染色时间来促使其着色。但分枝杆菌中的分枝菌酸与染料结合后,就很难被酸性脱色剂脱色,故名抗酸染色。
染色结果:麻风杆菌结合杆菌等抗酸菌红色,细胞核蓝色
注意事项:
1、苯酚碱性品红液保质期只有1个月,过期需要更换;
2、苯酚碱性品红液染色时间的长短会对阳性结果的深浅(即明显程度)会有很大影响,短时间5分钟也可以染上色,并且用盐酸酒精很容易分化背景,但是复染核后,抗酸菌的明显程度不高;染色时间超过20分钟,盐酸酒精很难分化掉背景,但是用20%的硫酸可以比较容易分化掉背景,并且复染核后,抗酸菌的红色依然很明显;
3、复染苏木素时间要短,半分钟内即可,并且染核后分化时间尽量短些(分化液中含有盐酸,会对抗酸菌的颜色有一定的影响)。
抗酸染色实验代测