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WB实验代测
免疫印迹(immunoblotting)又称蛋白质印迹(Western blotting),它是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。该法是在凝胶电泳和固相免疫测定技术基础上发展起来的一种新的免疫生化技术。由于免疫印迹具有SDS-PAGE 的高分辨力和固相免疫测定的高特异性和敏感性,现已成为蛋白分析的一种常规技术。免疫印迹常用于鉴定某种蛋白,并能对蛋白进行定性和半定量分析。
Western blotting服务实验流程
u 细胞及组织蛋白质抽提;
u 蛋白质定量;
u 变性聚丙烯酰胺不连续凝胶电泳(SDS-PAGE);
u 蛋白质转膜;
u 膜的封闭;
u 一抗、二抗孵育;
u 结果检测:化学发光法检测,X 胶片曝光显影;
u 数据分析;
代测说明:
1、有趋势,不需做预实验。
2、没有趋势,要求做预实验。
3、WB检测里包含了蛋白提取。
4、实验结束,返还胶图。
5、一个指标只能跑一张膜
WB实验代测的优势:
1、western免疫印迹是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。