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六胺银染色实验代测
六胺银染色简介:
六胺银染色是一种经典显示基底膜的方法。经过改良之后,组织经铬酸氧化,使真菌内的黏多糖暴露出醛基,醛基把六胺银还原为黑色的金属银。氯化金可使金属银转变为更稳定的金属金,同时使背景更清晰。海波可以固定并洗去未还原的银离子。
六胺银染色实验步骤(仅供参考):
1、六胺银固定于甲醛固定液中,常规脱水包埋。切片4微米,脱蜡至水洗。
2、切片入氧化剂氧化20分钟。流水稍洗。
3、入漂白液处理1分钟,以除去氧化剂。
4、流水冲洗5分钟,蒸馏水浸洗2次,每次30秒至60秒。
5、切片放入配制好的预热至60度的六胺银工作液中,加盖60度恒温染色大约20至60分钟,切片呈淡黄色即取出经水洗后显微镜观察是否有菌体出现。如有淡棕色菌体出现,应每隔5到10分钟观察一次以控制菌体着色深浅,直至显色理想;
6、入蒸馏水中清洗。
7、用氯化金溶液调色1到2分钟。蒸馏水洗1到2分钟。
8、置于海波溶液2分钟。流水冲洗5分钟。
9、滴加橙黄G一小滴复染1秒即用水冲洗。染色时间不能过长,否则将影响最终效果。
10、流水冲洗20秒-60秒。
11、常规脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。染色完成。
染色结果:真菌黑色,背景浅红色
六胺银染色实验代测