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内毒素清除琼脂糖凝胶
英文名称:Endotoxin Removal Reagent Berpharose Fast Flow
货号:B2820
规格:10ml
1.产品介绍
本公司生产的内毒素清除琼脂糖凝胶FF,可以特异去除病毒,核酸和蛋白等样品中的内毒素。本产品具有刚性好,特异性强,载量高,稳定性好,样品回收率高等特点。
本产品直接加入到样品中进行内毒素清除,不必装柱,使用方便,有效,利于放大生产,此外在使用过程中配基不脱落,安全可靠,可以重复使用。 处理后的样品内毒素含量可以小于0.1EU/mg
2.规格
10ml、25ml、100ml、500ml、1L 使用方法
缓冲液配制:
再生液:1%脱氧胆酸钠、20 mM磷酸盐缓冲液、pH7.0
(称取Na2HPO4.12H2O 2.43g、NaH2PO4.2H2O 0.25g、NaCl 4.5g、脱氧胆酸钠
5.0g、加注射用水溶解,定容至500ml)
平衡液:20 mM磷酸盐缓冲液、pH7.0
(称取Na2HPO4.12H2O 2.43g、NaH2PO4.2H2O 0.25g、NaCl 4.5g、加注射用水
溶解,定容至500ml)
实验步骤:
再生:用1-2倍填料体积的再生液抽洗,再用3-5倍填料体积的再生液将凝胶充分混匀,
保持 10min。
平衡:用5-10倍填料体积的平衡液,对填料进行平衡,重复5-10次。
上样:(1)直接混合法:
①根据样品溶液中内毒素的含量加入一定量经上述预处理好的填料,于三角瓶中 4℃、150rpm振荡,直至充分去除内毒素。
② 将以上样品无菌过滤,测内毒素含量。
(2)过柱法:
①将经上述预处理好的填料装填到色谱柱中
②流速控制在0.25ml/min左右上样,把流穿的样品液,再次加入到上样液中,循环上样,直至充分去除内毒素。
注:由于有时候内毒素和样品的结合,需要较长时间去除,因此通常情况下直接混匀法优于过柱法。
5.注意事项:
(1)各操作中样品、填料接触到的全部仪器设备耗材均应为无热源(无内毒素)。
(2)0.2µm 滤膜要用 0.1M NaOH 浸泡过夜后,121℃高压灭菌30min。
(3)脱氧胆酸钠溶液低温容易成胨状,使用时温度可以到30℃,避免流不动堵柱子或漏斗。
(4)该亲和填料每次使用前都需进行填料再生步骤。
(5)配制缓冲液要用无内毒素的注射级用水,配制过程要防止引入内毒素。
(6)适当延长填料与样品溶液的处理时间可以加大内毒素的吸附量。
(7)如需使用磁力搅拌要注意转速别太快,避免填料颗粒破碎。
(8)样品如果本身是带负性电荷,为增加样品回收率,样品中可以加≤0.2M NaCl。
(9)样品 pH7-9范围内。
(10)样品内毒素太高,超过填料处理量,需要稀释样品找到内毒素的范围,和经去除后内毒素的范围对照,就可以知道效果,如果一次去除不完-全,可以重复,直到合格为止。
(11)本产品保存条件为20%乙醇,4~8℃。
(12)2-25℃,常压,避光运输。
(13)仅供科研实验使用。