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网织红细胞计数液
一、原理:
网织红细胞(Reticulocyte Ret)是一种幼稚的无核红细胞,其胞浆中仍残留有嗜碱性的核糖核蛋白痕迹,可被碱性染料在活体时染色。
二、试剂组成:
R1:网织红细胞染色贮备液 16mL×1 瓶,4℃保存。
R2:网织红细胞染色稀释液 60mL×1 瓶,4℃保存。
三、染色:
1、取一小试管或塑料小离心管,加入 R1 网织红细胞染色贮备液 100μ1,再加等量全血混匀。37℃或室温孵育 15~20min,制备成 A 混合液。
2、取此 A 混合液 20μL,再加 2 倍体积 R2 网织红细胞染色稀释液 40μL 混匀,制备成 B 混合液。
3、从 B 混合液中取 3μL 推成薄片,待干。
4、不需固定或复染,直接用油镜计数。
四、计数方法:
1、计数 1000 个红细胞中含有多少网织红细胞,最后按百分比报告。
2、也可用 Mi1ler 窥盘数 1000 个红细胞中网织红细胞(Reticu1ocyte Ret)的数量,最后按百分报告。
五、注意事项
注 1:建议取样后在短时间内及时操作计数。
注 2:网织红细胞比一般红细胞略大,故在涂片的尾部和两边分布较多,因此在计数时要兼顾到这些区域。
注 3:点彩红细胞和脾切除后铁粒小体(Pap-penheimer 体),在本法均已计入,不能区别。
注 4:本试剂盒仅用于科研。
网织红细胞计数液