大鼠肾小球系膜细胞(HBZY-1)
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2017-07-25 16:10:44
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上海酶联生物研究所

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产品简介

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详细介绍

大鼠肾小球系膜细胞(HBZY-1)
细胞介绍大鼠肾小球系膜细胞,贴壁生长,常用于发生机理的临床研究,也可用干构建动物摸型。
细胞特性
1)来源:大鼠肾
2)形态:上皮细胞样,贴壁生长
3)含量:>lxl06 个/mL
4)污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格:T25瓶或者lmL冻存管包装运输和保存:使用含有优质胎牛血清的2ml冻存管发送存活细胞。
收到细胞后,可在1000RPM,常温条件下,离心5min后,于洁净操作台弃去上清,加入*使用的培养基后转移至l〇cm培养皿者T25培养瓶中培养,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。


大鼠肾小球系膜细胞(HBZY-1)
细胞用途:仅供科研使用。
细胞培养步骤
1)培养基及培养冻存条件准备:
1.准备DMEM培养基(DMEM,GIBCO,货号11965-092),90%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,货号 16000-044),10%。
2.培养条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37摄氏度。
3.冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。液氮储存
2)细胞处理:
1.复苏细胞:将含有lmL细胞悬液的冻存管在37°C水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加l-2mL培养基后吹匀。
然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入l〇cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。
第二天换液并检查细胞密度。
2.细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。


大鼠肾小球系膜细胞(HBZY-1)
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。力口 2m丨消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中,置于37°C培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加l-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者
3.细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。
下面T25瓶为例;
细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入lml*,细胞变圆脱落后,加入2ml*培养基终止消化,可使用血球计数板计数。lOOOrpm离心4min去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至zui终浓度为10%。
加入DMSO后迅速混匀,按每lml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。
记录冻存管位置以便下次拿取。
注意事项:
收到细胞后,若发现干冰己挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们。
所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃瓶中。

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