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本公司的小鼠细胞色素b5还原酶elisa试剂盒,在出厂前均经质检部对其进行严格的品质鉴定,严把质量关。公司系列ELISA试剂盒产品丰富,并将不断推出新产品,满足广大科研工作者的需要。
检测范围:156.25 -10000 pg/ml
原理类型:双抗夹心
保存条件:2-8℃
有 效 期:六个月
试剂盒保存:2-8℃
适 合 样本:血清、血浆、组织、上清、卵母细胞等相关体液
小鼠细胞色素b5还原酶elisa试剂盒的实验原理:
固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA)。已知浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将已知浓度的标准品和*标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中的浓度呈比例关系。
间接法的操作步骤:
1、用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃过夜。
2、次日洗涤3次。加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。同时做空白、阴性及阳性孔对照于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml,37℃孵育30-60分钟,洗涤,zui后一遍用DDW(超纯水)洗涤。其余步骤同“双抗体夹心法”的4、5、6。
3. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟。4. 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
5. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测O?D值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔O?D值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。
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