土壤脲酶（Solid-Urease，S-UE）测定试剂盒说明书
For Research Use Only

仅供研究用
货号：QYS-235084
分光光度法 50 管/24 样

测定意义：

土壤脲酶（Solid-Urease，S-UE）测定试剂盒说明书S-UE能够水解尿素，产生氨和碳酸。土壤脲酶活性与土壤的微生物数量、有机物质含量、全氮和*氮含量呈正相关。土壤脲酶活性反应了土壤的氮素状况。
测定原理：

利用靛酚蓝比色法测定脲酶水解尿素产生的 NH3-N。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰、甲苯（不允许快递）和蒸馏水。
土壤脲酶（Solid-Urease，S-UE）测定试剂盒说明书试剂的组成和配制：

试剂一：甲苯 10mL×1 瓶，4℃保存；（自备）

试剂二：粉剂×1 瓶，临用前加入 20mL 蒸馏水，充分溶解待用，4℃保存；用不完的试剂 4 ℃保存；
试剂三：液体 65mL×1 瓶，4℃保存；
试剂四 A 液：液体 1mL×1 瓶，4℃保存；试剂四 B 液：液体 4mL×1 瓶，4℃保存；临用前将 A 液倒入 B 液中混合，待用；用不完的试剂 4℃保存一周；
试剂五：液体 5mL×1 瓶，4℃保存；
测定步骤：

1 、培养

        测定管        对照管
                
风干土样(g)        0.25        0.25
试剂一（μL）        125        125
    振荡混匀，使土样全部湿润，室温放置 15min    
试剂二（μL）        625        
蒸馏水（μL）                625
试剂三（μL）        1250        1250
                

      混匀，放入 37℃水浴培养 24h 后，10000g 常温离心 10min，取上清液。
2、将培养结束的上清液稀释 10 倍（取 0.1mL 上清液，加入 0.9mL 蒸馏水）。
3、测氨量
    测定管    对照管
        
稀释后的上清液（μL）    400    400
试剂四（μL）    80    80
试剂五（μL）    60    60
    充分混匀，室温放置 20min    
蒸馏水（μL）    460    460

混匀， 578nm 处蒸馏水调零，测 A 值，ΔA=A 测定管-A 对照管。每个测定管设一个对照管。
脲酶活力计算
标准条件下测定的回归方程为 y = 0.0915x +0.0373；x 为标准品浓度（μg/mL），y 为吸光值。单位的定义：每天每 g 土样中产生 1μg NH3-N 定义为一个酶活力单位。
脲酶活力（U /g 土样）＝(ΔA-0.0373) ÷0.0915×10×V 反总÷W÷T =874×(ΔA -0.0373) 10：稀释倍数；T：反应时间，1d； V 反总：反应体系总体积：2mL；W：样本质量，0.25g。