*(glutamic acid，Glu)含量测定试剂盒说明书
分光光度法 50 管/48 样
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定 测定意义：
Gu 广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，不仅是组成蛋白质的 20 种氨基酸之一， 而且通过转氨基作用参与多种氨基酸合成，是生物体内主要氨基来源之一。此外，Glu 还是 味精的主要有效成分，常用做食品添加剂以及香料生产。
*(glutamic acid，Glu)含量测定试剂盒说明书测定原理：
利用提取液提取，然后用显色剂进行显色，显色后在 570nm 下进行测定。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1 mL 玻璃比色皿、研钵、冰、蒸馏水。
试剂的组成和配制：
试剂一：液体 100mL×1 瓶，4℃保存；
试剂二：粉剂×1 瓶， 4℃保存；临用前加入 10mL 蒸馏水，充分混匀溶解，用不完的试剂 仍 4℃保存。
*提取：
1、细菌或培养细胞样品：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞 数量（104 个）：试剂一体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 1000  万细菌或细胞加入 2mL 试剂一），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10s，重 复 30 次）；8000g  常温离心 10min，取上清，置冰上待测。 2、组织样品：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.2g 组 织，加入 2mL 试剂一），进行冰浴匀浆。8000g  常温离心 10min，取上清，置冰上待测。 3、血清（浆）或细胞培养液样品：按照血清（浆）或细胞培养液体积（mL）：试剂一体积 (mL)为 1：5~10 的比例（建议取 0.2mL 血清（浆）或者细胞培养液加入 2mL 试剂一），进 行冰浴匀浆。8000g  常温离心 10min，取上清，置冰上待测。

测定步骤
1、 分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 570nm，蒸馏水调零。
2、 在有盖 EP 管中加入下列试剂：
试剂名称（μL）    测定管    对照管
样本    1000    
试剂一        1000
试剂二    200    200
混匀，90℃水浴 20min（盖紧，以防止水分散失），流水冷却，于 570nm 波长处比色，△A=A
测定管-A 对照管。对照管只要做一管。 
*(glutamic acid，Glu)含量测定试剂盒说明书注意事项：
为提高检测灵敏度，测定管的吸光值应小于 1，若大于 1 则需要将上清液用试剂一稀释至适 当倍数后测定，计算公式中乘以相应稀释倍数。

*含量计算：
1、标准条件下测定回归方程为 y = 0.0328x- 2.423； x 为*含量（µg/mL），y 为吸光值。
2、按照血清（浆）或者细胞培养液体积计算
*含量(μg/mL)= [(△A +2.423)÷0.0328×V1]÷(V3×V1÷V2）=304.9×(△A+2.423)
3、按照蛋白浓度计算
*含量(µg/mg prot)=[(△A +2.423)÷0.0328×V1]÷(V1×Cpr)=30.49×(△A+2.423) ÷Cpr
4、按照样本质量计算
*含量(µg/g 鲜重)=[(△A +2.423)÷0.0328×V1]÷(W ×V1÷V2)=61×(△A+2.423) ÷W
5、按照细菌或细胞密度计算
*含量(μg/104 cell)=[(△A +2.423)÷0.0328×V1]÷(1000×V1÷V2)=0.061×(△A+2.423)
V1：加入反应体系中样本体积，1mL；V2：加入提取液体积，2 mL；V3：加入血清（浆） 或细胞培养液体积，0.2 mL； Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；1000： 细菌或细胞总数，1000 万。 注意：该试剂盒仅适用于发酵液或组织中*含量测定，检测下限为 70µg/mL。