产品名称：ATCC小鼠巨噬细
品牌：ATCC
产地：美国
规格：5 x10^5，1ml

上海雅吉生物还建立了严格的细胞鉴定流程，所提供的原代细胞均需经过细胞类型特异性标记物、细胞形态学等检测，保证细胞纯度在90%以上；同时也需经过微生物检测，保证不含有HIV、HBV、HCV、支原体、真菌及其他类型的细菌。

实验材料：

1. 手术切除的正常肺组织

2. */EDTA液：0.05%*，0.5mmol/L EDTA

3. 6孔培养板：用多聚赖氨酸包被

4. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS（pH=7.4），添加200000IU/L*、200mg/L*和200000U/L*，pH7.4

5. *、解剖剪、解剖镊、眼科剪，*

6. 离心管（15ml、50ml）

ATCC小鼠巨噬细实验方法：

1. 将肺组织至于无菌的培养皿中用含双抗的1×PBS（pH=7.4）清洗若干次至无明显血细胞；

2. 剪取肺组织边缘微血管丰富的组织，用含双抗的1×PBS（pH=7.4）清洗两次；

3. 将剪取的肺边缘*成2-3mm3 大小，加入含双抗的1×PBS（pH=7.4）清洗；

4. 用进行过灭菌处理的玻璃滴管将剪碎的组织块和清洗用的1×PBS（pH=7.4）一起转入15ml离心管中；

5. 250rpm/min离心2 min，小心倾去液体，再加入适量的含双抗的1×PBS（pH=7.4），用玻璃滴管吹吸液体以清洗组织块；

6. 继续250rpm/min离心2 min，小心倾去液体，重复上述步骤若干次，直至离心后的液体中观察不到明显的红色；

7. 将清洗好的组织块重新转至无菌的培养皿中，用无菌的200 ml的吸头将组织块贴于25cm2 培养瓶中；

8. 加入2ml培养基，将培养瓶倒置放于37℃、5%CO2 的培养箱中2-3h之后正置培养瓶继续培养；

9. 培养若干天后，可观察到组织块周围陆续有细胞爬出，继续培养几天，直至组织块周围的细胞达到较高密度（培养其间两天换液一次，换液操作时动作一定要轻柔，以防组织块被摇下）；

10.  当组织块附近的细胞生长到较高密度后，将贴壁的组织块吹下，换新的培养基继续培养24；

11.  24h后，用0.25%的Trypsin-EDTA消化细胞，FBS中止消化，将消化后的细胞悬液转入15ml离心管，1000rpm/min离心5min，之后倾去废液，用培养基重悬细胞，转入原来的培养瓶中，继续在37℃、5%CO2 的培养箱中培养。
为使客户能尽快开展实验，上海雅吉生物发货的原代细胞均处于对数生*，且每次发货为汇合率达到70%的细胞，收到细胞后即可开展实验。

购买细胞注意事项：
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们。
2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养过夜，隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常，请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活力，请拍下照片及时和我们，信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件;建议直接购买上海雅吉生物提供的*培养基。
5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和上海雅吉生物技术部沟通交流。
6. 该细胞只能用于科研，不得用于临床应用。

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