PCR试剂盒-上海信裕生物科技有限公司

详细介绍

PCR试剂盒

它具有下列特点：

1. 即开即用，用户只需要提供 DNA 模板。

2. 引物经过精心优化，专一性强，只扩增巴斯德氏杆菌属，与其他微生物没有交叉反应。

3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。

4. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。

5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次，但只能用于科研。

规格及成分

成分	编号	十孔盒包装
PCR MagicMix 3.0	试剂一	1 mL（红盖）
超纯水	试剂二	1 mL（亮黄色）
巴斯德氏杆菌属PCR引物混合液	试剂三	100 μL（白盖）
巴斯德氏杆菌属PCR 阳性对照（1×10E8 拷贝/μL）	试剂四	50 μL（黄盖）
核酸释放剂（试用装）	试剂五	20 次（1 mL，绿盖）
使用手册	试剂六	1 份

运输及保存：低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其他试剂。

自备试剂：样品 DNA。

PCR试剂盒使用方法：

一、样品 DNA 的制备

1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。本试剂盒免费赠送20 次核酸释放剂试用装，其使用手册可以从本公司网站订购核酸释放剂。

2. 如果有 N 个样品，则需要做 N+2 个提取，包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水（取决于试剂盒要求的样品起始量）中加 10μL 补骨脂 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液而得，样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后后得到模板 DNA 放冰上待用。

二、设置 PCR 反应（40μL 体系）

3. 对 N+2 个样品，在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性对照，故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分：

成分	N+2 个样品管	PCR 阴性对照	PCR 阳性对照
PCR MagicMix 3.0	各 20 μL	20 μL	20 μL
巴斯德氏杆菌属PCR引物混合液	各 2 μL	2 μL	2 μL
N+2 个样品 DNA 模板	各 18 μL	--	--
PCR 阴性对照（水）	--	18 μL	--
PCR 阳性对照（巴斯德氏杆菌属PCR阳性对照的 1000 倍稀释液）	--	--	18 μL

4. 按下表设置 PCR 反应：

过程	温度	时间
预变性	95℃	5 min
PCR 反应（35 个循环）	95℃	15 sec
	57℃	15 sec
	72℃	40 sec
后延伸	72℃	10 min

三、电泳检测

5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳性对照必须有预期条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。

产品简介

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