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综合微生物的培养方法,包括以下步骤:
(1)前期准备:(A)灭菌处理;(B)制备Biolite水;(C)检查设备和材料;
(2)按比例配制培养材料;
(3)导入曝气,进行繁殖培养;
(4)取液观察;(a)取液;(b)稀释菌液;(c)平板培养;
(5)分离并检测;
(6)取液储存;通过该综合微生物培养方法简单可操作性强,培养的综合微生物均在3代以内,菌类稳定不发生突变,且繁殖快速。
规格参数:
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
冬虫夏草(斜面)说明书 | Ophiocordy | EY-J963312 |
资源名称: 冬虫夏草(斜面)
种属: Ophiocordyceps sinensis (Berk.) G.H. Sung J.M. Sung Hywel-Jones
提供形式: 斜面培养物
模式菌株: no
应用领域: 研究;教学。食药用菌
培养基: 综合PDA:马铃薯煮汁1000mL,二氢钾 3g,镁 1.5g,葡萄糖 20g,1 10mg,琼脂 20g,pH自然,121℃,15min。
低温存法:
①简单保存法,将琼脂斜面孢子培养物、菌丝悬浮液以及由麸皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培养物置于4℃冰箱保存,保存时间不超过1~2个月,若将谷物原料制备的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蜡,以隔绝外界空气和水汽,保持时间可达3~4个月;②液氮超低温保存法,将生长稳定期的细胞悬浮在10%甘油或其他低冰点液体中,密封于安瓿管内,然后控制冷却速度,使安瓿管温度逐步下降至 -35℃时,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多数微生物如病毒、噬菌体、多种细菌、放线菌、酵母和原虫、特别是一些用冷冻干燥法有困难的微生物,都可用此法保存。
微生物菌种的培养:
⒈ 孢子制备
⑴ 放线菌孢子的制备
一般采用琼脂斜面培养基,培养基中含有一些适合产孢子的营养成分,如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。碳源和氮源不要太丰富(碳源约为1%,氮源不超过0.5%),碳源丰富容易造成酸性的营养环境,不利于放线菌孢子的形成,氮源丰富则有利于菌丝繁殖而不利于孢子形成。一般情况下,干燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。放线菌斜面的培养温度大多数为28 ℃,少数为37 ℃,培养时间为5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制备
霉菌的孢子培养,一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。这是由于这些农产品中的营养成分较适合霉菌的孢子繁殖,而且这类培养基的表面积较大,可获得大量的孢子。霉菌的培养一般为25~28 ℃,培养时间为4~14天。
⒉ 种子制备
⑴ 摇瓶种子制备
摇瓶种子进罐,常采用母瓶、子瓶两级培养,有时母瓶种子也可以直接进罐。种子培养基要求比较丰富和*,并易被菌体分解利用,氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各种营养成分不宜过浓,子瓶培养基浓度比母瓶略高,更接近种子罐的培养基配方。
⑵ 种子罐种子制备
种子罐种子制备的工艺过程,因菌种不同而异,一般可分为一级种子、二级种子和三级种子的制备。孢子(或摇瓶菌丝)被接入到体积较小的种子罐中,经培养后形成大量的菌丝,这样的种子称为一级种子,把一级种子转入发酵罐内发酵,称为二级发酵。如果将一级种子接入体积较大的种子罐内,经过培养形成更多的菌丝,这样制备的种子称为二级种子,将二级种子转入发酵罐内发酵,称为三级发酵。同样道理,使用三级种子的发酵,称为四级发酵。
Burkholderia vietnamiensis 中文名称:越南伯克霍尔德氏菌Burkholderia vietnamiensis提供形式:冻干安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:33或109生长条件:30℃ 纯度:98%
Kurthiasibirica 中文名称:西伯利亚库特氏菌Kurthiasibirica安全等级:1模式菌株:yes应用领域:模式菌株:培养方法培养基:107生长条件:25℃ 纯度:97%
Viridibacillusarenosi 中文名称:ViridibacillusarenosiViridibacillusarenosi分离基物:土壤,荷兰安全等级:1模式菌株:yes应用领域:模式菌株:培养方法培养基:110生长条件:30℃ 纯度:97%
Rummeliibacillusstabekisii 中文名称:RummeliibacillusstabekisiiRummeliibacillusstabekisii安全等级:1模式菌株:yes应用领域:模式菌株:培养方法培养基:2生长条件:30℃ 纯度:97%
Acidovorax│facilis 中文名称:敏捷食菌Acidovorax│facilis提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:yes培养方法培养基:A2生长条件:30℃存储条件:-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:CP,98%
Pseudomonasluola 中文名称:PseudomonasluolaPseudomonasluola分离基物:人类伤口安全等级:1模式菌株:yes应用领域:模式菌株:培养方法培养基:104生长条件:30℃ 纯度:指示剂级
Thalassospirapermensis 中文名称:ThalassospirapermensisThalassospirapermensis分离基物:盐矿附近的污染土壤安全等级:1模式菌株:yes应用领域:模式菌株:培养方法培养基:102生长条件:30℃ 纯度:指示剂级
Maritimibacralkaliphilus 中文名称:MaritimibacralkaliphilusMaritimibacralkaliphilus分离基物:海,大西洋安全等级:1模式菌株:yes应用领域:模式菌株:培养方法培养基:102生长条件:30℃ 纯度:≥99%
冬虫夏草(斜面)说明书50260人支气管上皮细胞微小RNA3--2,4-二氟苯甲DYKDDDDK Tag(CT)/Flag-Tag 标签DYKDDDDK Tag分支肽
50270人气管上皮细胞微小RNA3--2,4-二氟苯甲T7 tag(recombinant T7-tagged proteins) T7 tag标签抗原
50240人小气道上皮细胞微小RNA炔胺盐盐V5 tag(recombinant V5-tagged protein) V5 tag多肽抗原
酵母提取(膏)人肺成纤维细胞微小RNA炔胺盐盐KT3 tag KT3 tag标签抗原
50090人支气管平滑肌细胞微小RNA环磺酰胺VSV-G tag(vesicular stomatitis virus glycoprotein) VSV-G tag标签抗原
50092人气管平滑肌细胞微小RNA环磺酰胺HLA-DR(human leukoyte Antigen DR) HLA-DR抗原
50093人骨骼肌细胞微小RNAHLA-E 人类白细胞抗原E
50094人骨骼肌卫星细胞微小RNAAnti-HMGA1 (high mobility group AT-hook 1) 高迁移率族蛋白A1抗原